已经包被的抗体,抑制包被抗体与酶标物结合。加入底物后,产生的颜色强弱与样品中**的浓度成反比。
试剂盒组成部分和储存
本试剂盒应当在 2-8℃的温度下储存,有效期为一年。如果超过 2 周不使用试剂盒,请将标准品和酶标物放置-20℃或者冰冻保存。
1) 标准品中含有 MQCA,请小心使用。 2) 不要使用过期的试剂盒。 3) 不同批次的试剂盒不要混用,抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。确保抗体、酶结合物及酶结合物稀释液正确配制。 4) 尽量保持室温(22.5±2.5)°C,避免在通风口操作防止温度过低,过热和/或者蒸发。同样的,不要在阳光直射下实验,防止过热及蒸发。在孵育期间,如果工作台温度过低,应该铺垫若干 纸巾或者其他物料。 5) 水质量很重要,确保使用蒸馏或者去离子水。 6) 加入样品或者试剂到空的微孔板时,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接触。 7) 孵育时间的计算越规范越好,保持添加标准品的一致性,先添加标准品后添加样品。 8) 从低浓度到高浓度地添加标准品,降低影响标准品曲线质量的风险。 9) 将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中,冷藏保存。 检测: 以下为计算份量的表格,用户可根据自己的需要来确定需要配置多少试剂。 试剂 每个反应需要的体积 4 24 次反应的体积 酶标物 50 uL 1.2mL 工作洗液 2 mL 48mL 终止液 100 uL 2.4 mL 底物 100 uL 2.4 mL (1) 加入 100uL 的标准品或样品于所设定的孔中; (2) 在每孔中加入 50uL 酶标物, 轻轻摇动微孔板混匀 1 分钟; (3) 室温(22.5±2.5)°C 避光孵育 30 分钟; (4) 洗板 3 次,每次加入 250uL 1×洗液,*后一次尽量甩干并在吸水纸上吸干; (5) 加入 100uL 的 TMB 底物,室温(22.5±2.5)°C 避光孵育 10-15 分钟; (6) 加入 100uL 的终止液终止反应,在 450nm 下读 OD 值(读数前使用无绒布擦拭微孔底部水分和指模)。