KS-802色谱柱使用说明书
1 色谱柱规格
产品名称 |
理论塔板数 |
基 质 |
分离模式 |
抗衡离子 |
排阻限 |
尺寸I.D.×L(mm) |
KS-802 |
17,000 以上 |
苯乙烯-二乙烯基苯共聚物 |
SEC+配位体交换 |
磺基(Na2+) |
10,000 |
8.0×300 |
产品名称 |
粒径(μm) |
最大耐压(MPa) |
常用流量(mL/min) |
最大使用流量(mL/min) |
使用温度范围(℃) |
出厂时溶剂 |
KS-802 |
6 |
5.0 |
0.5~1.0 |
1.5 |
~85 |
H2O |
标准使用条件:流动相 H2O;流量 0.5~1.0 mL/min;色谱柱温度 50~85℃
2 使用注意事项
Shodex SUGAR KS-801 可以只用水作流动相,对单糖、二糖、寡糖、多糖及糖醇等碳水化合物或非离子性的水溶性物质进行分离。
Ⅰ 使用注意事项
(1)操作上注意
1)作为流动相的脱离子水,用0.45μm 的过滤器过滤,加热到60℃后,放入超声波清洗器中,边超声边减压充分脱气。使用了在线脱气机的话可省略前面的脱气操作。
2)避免突然压力或流量的改变。
不要超过色谱柱的压力上限。超过压力上限的话会使性能降低,无法回复。
3)糖类在色谱柱温度60℃以上分析分离效果好。但不要超过85℃
4)样品亲水性高会引起吸附,使保留体积增大。此时在流动相中添加乙醇、乙腈等极性有机溶剂,可减少保留体积。要注意添加有机溶剂的浓度要在20%以下。
5)流动相去离子水中如果混有有机物或金属离子的话,会导致糖峰形变宽。
(2)安装色谱柱
1)色谱柱安装之前请用分析用流动相对装置进行完全置换。
2)如果装置中使用了与水不互溶的有机溶剂的话,首先用丙酮、乙醇等与水互溶的有机溶剂置换后再置换成水。
3) 如果使用了进样环,请别忘记对进样环中的溶剂和空气进行置换。
4)色谱柱连接时注意避免空气混入。
(3)色谱柱拆取与保存
1)色谱柱加热使用后,在保持0.2mL/min 送液状态下色谱柱冷却至室温。
2)色谱柱从装置中取下后,放在温度波动不大(18~28℃)的场所保存。
绝对要避免色谱柱内溶剂冻结现象的发生。
Ⅱ 样品前处理
(1)样品用流动相溶解。
(2)样品溶液与流动相不同时,进样后会生成沉淀,堵塞色谱柱的情况。
为了降低溶剂峰,样品尽量用与流动相相同的溶剂来溶解。
(3)样品是水溶性,并且含有乙醇等有机溶剂时,要用水将有机溶剂浓度稀释到20%以下。
(4)样品含有蛋白质时,要除去蛋白质。
样品溶液约5mL 中加入数滴磺基水杨酸溶液(20g/dL)混合后,再用0.45μm 过滤器过滤。
3 色谱柱性能的测试方法
按照下面的条件,对色谱柱进行性能测试(详情请参考色谱柱附带的出厂检查报告COA)
色谱柱 |
流动相 |
流量 |
色谱柱温度 |
样品 |
注入量 |
KS-802 |
H2O |
1.0mL/min |
50℃ |
2.5%乙二醇 |
5μL |
4 色谱柱的再生
如果色谱柱吸附了不纯物,果糖或葡萄糖的峰会变宽。
可按照下面的操作对色谱柱进行再生。
色谱柱 |
再生液 |
色谱柱温度 |
操作 |
KS-802 |
0.01N NaOH水溶液 |
50℃ |
0.5mL/min 送液 |
再生后请置换成去离子水。
(也可用0.1N NaOH 水溶液进样40μL 的方法来进行再生)