NH2P-50 2D色谱柱使用说明书
1 色谱柱规格
产品名称 |
理论塔板数 |
官能团 |
基 质 |
分离模式 |
粒径 (μm) |
尺寸I.D.×L(mm) |
NH2P-50 2D |
3500 以上 |
氨基 |
聚乙烯醇 |
正相分离 |
5 |
2.0×150 |
产品名称 |
最大耐压(MPa) |
最大使用流量(mL/min) |
使用温度 范围(℃) |
使用PH 范围 |
出厂时溶剂 |
NH2P-50 2D |
10.0 |
0.4 |
4~50 |
2~13 |
CH3CN/H2O=75/25 |
标准使用流量:0.1~0.2 mL/min;使用频率高时,建议在通常流量下使用。
2 使用上的注意事项
聚合物氨基柱与硅胶氨基柱相比,在同样的流动相条件下分离性能高,再现性好。适用于宽的PH 范围(PH2~13)及各种缓冲液。
Ⅰ 操作注意事项
1) 一定要在规定的压力、流量、温度范围内使用。
如果瞬间超过最高使用压力、或最大使用流量,都有可能会损坏色谱柱。
2) 样品必须用流动相来配制。
对于流动相(如:乙腈/水=75/25)难溶解的样品,可将样品在纯水中溶解后,再加乙腈调成与流动相相同的组成。
3) 连接色谱柱之前,对液相流路系统进行充分的清洗。
清洗方法如下。
A 流动相是极性溶剂/水的情况下
清洗液:NH2P 色谱柱测试用流动相
清洗量:100mL
注意点:拨动切换阀,对进样系统也要进行清洗。
B 流动相是缓冲液的情况下
清洗液:①纯水 40mL ②50mM 磷酸水溶液
③纯水 40mL ④50mM 氢氧化钠水溶液 100mL
⑤纯水 100mL ⑥NH2P 色谱柱测定用流动相 100mL
注意点:拨动切换阀,对进样系统也要进行清洗。
C 色谱柱流动相置换时,置换流量为0.1mL/min 以下。
4)色谱柱的再生
如果液相流路系统中含有污染填料的成分(金属离子等),会引起糖类的洗脱异常、分离性能降低。因此3)流路清洗非常重要。如果出现类似的分析异常,可以对色谱柱进行再生,有可能柱性能会回复。再生方法如下。
流量:0.5mL/min
清洗液(清洗时间): ①纯水(10min) ②0.1M 高氯酸溶液(2 hr)
③纯水(10min) ④0.1M 氢氧化钠水溶液(2 hr)
⑤纯水(20min) ⑥NH2P 色谱柱测定用流动相(1 hr)
Ⅱ 各种流动相使用注意事项
1) 糖分析
① 水、乙腈和乙醇的混合液或各单独液的任意比率都可使用。因乙醇水溶液的黏度高,使用流量请低于通常流量。
② 上述的溶液中,也可使用乙腈或乙醇能溶的各种缓冲试剂(如氢氧化四丙基铵、醋酸、醋酸钠)。使用时请确认是否有沉淀的析出。
③ PH 使用范围2~13
2) 作为离子交换色谱柱使用
① 磷酸盐、醋酸盐等各种缓冲液及氯化钠、氯化钙、硫酸钠等可同时使用。
② PH 使用范围2~13
3) 使用温度
4℃~50℃范围下使用。高温使用时注意防止生成气泡。低温下由于流动相黏度升高,建议在低流量下使用。
4)色谱柱的再生(简单再生法)
0.1N 的NaOH 水溶液在低于通常流量下以10~20 倍色谱柱体积流过色谱柱。
碱洗净后,一定要置换成30~80%的乙腈水溶液后保存。
3 色谱柱性能的测试方法
按照下面的条件,对色谱柱进行性能测试(详情请参考色谱柱附带的出厂检查报告COA)
色谱柱 |
流动相 |
流量 |
色谱柱温度 |
样品 |
注入量 |
NH2P-50 2D |
CH3CN/H2O=75/25 |
0.2mL/min |
室温约30℃ |
5mg/mL Sucrose |
6μL |