您好,欢迎来到仪表展览网!
请登录
免费注册
分享
微信
新浪微博
人人网
QQ空间
开心网
豆瓣
会员服务
进取版
标准版
尊贵版
|
设为首页
|
收藏
|
导航
|
帮助
|
移动端
|
官方微信扫一扫
微信扫一扫
收获行业前沿信息
产品
资讯
请输入产品名称
噪声分析仪
纺织检测仪器
Toc分析仪
PT-303红外测温仪
转矩测试仪
继电保护试验仪
定氮仪
首页
产品
知识
专题
词条
品牌
资料
展会
成功案例
网上展会
词多 效果好 就选易搜宝!
莱因特电子系统(上海)有限公司
新增产品
|
公司简介
注册时间:
2013-08-12
联系人:
电话:
Email:
首页
公司简介
产品目录
公司新闻
技术文章
资料下载
成功案例
人才招聘
荣誉证��
联系我们
产品目录
VITL系列
当前位置:
首页
>>>
技术文章
>
技术文章
电泳浓缩胶压缩原理-混匀仪技术文章
电泳浓缩胶压缩原理-混匀仪技术文章
电泳浓缩胶压缩原理-混匀仪技术文章
在不连续电泳中,样品在含有高于它的
pH
缓冲液中进行电泳。此时样品以负离子形式存在,它在浓缩胶中(
pH
略低于样品)被高度浓缩呈薄层而实现提高分辨率的目的。
例如:待分离样品是血清蛋白,浓缩胶用
Ph6.7
的
Tris-HCl Buffer
配制,电泳
Buffer
用
ph8.3
的
Tris-
甘氨酸,配制。
电泳开始以后,我们待分离的样品蛋白在进入
pH6.7
的浓缩胶中,在电场和电泳
Buffer
的共同作用下解离成负离子向正极泳动。同时电泳
Buffer
中的甘氨酸,因为其等电点为
6.0
所以在此过程中只有少部分解离(
0.1-1%
)成负离子向正极泳动。同时浓缩胶中的
HCl
解离度*大,几乎全部释放出氯离子向正极泳动。
根据电泳有效泳动率的公式;解离度(α)与泳动率(
m
)的乘积等于有效泳动率(
m
α)。在本次不连续电泳体系中,氯离子的有效泳动率*大称为快离子,甘氨酸电离出的负离子有效泳动率*小称为慢离子,而样品中的各种成分蛋白质的有效泳动率则介于快、慢离子之间。
因此在电泳开始的时候,快离子快速向正极泳动,慢离子和样品蛋白离子泳动滞后,因此在快离子后面形成一条离子浓度较低的低电导区域。由于电导与电势梯度成反比,因此在此区域产生了较高的电势梯度,由于泳动率(
m
)与电势梯度呈正比,使得慢离子和样品离子根据其α的大小,有序的加速向快离子靠拢,*后在进入分离胶的时候形成我们通常见到的压缩现象。
所以,压缩现象不能形成的主要原因是:
一、
缺乏快离子,浓缩胶中的
Buffer
失效。
二、
缺乏慢离子,电泳
Buffer
的
pH
不适当。
三、
电泳样品上样量过大,超过浓缩胶中
Buffer
的缓冲容量。
转自生命科学论坛
上一篇:
分子生物学-混匀仪技术文章
下一篇:
分子生物学试剂-混匀仪技术文章
若网站内容侵犯到您的权益,请通过网站上的联系方式及时联系我们修改或删除