您好,欢迎来到仪表展览网!
请登录
免费注册
分享
微信
新浪微博
人人网
QQ空间
开心网
豆瓣
会员服务
进取版
标准版
尊贵版
|
设为首页
|
收藏
|
导航
|
帮助
|
移动端
|
官方微信扫一扫
微信扫一扫
收获行业前沿信息
产品
资讯
请输入产品名称
噪声分析仪
纺织检测仪器
Toc分析仪
PT-303红外测温仪
转矩测试仪
继电保护试验仪
定氮仪
首页
产品
知识
专题
词条
品牌
资料
展会
成功案例
网上展会
词多 效果好 就选易搜宝!
莱因特电子系统(上海)有限公司
新增产品
|
公司简介
注册时间:
2013-08-12
联系人:
电话:
Email:
首页
公司简介
产品目录
公司新闻
技术文章
资料下载
成功案例
人才招聘
荣誉证书
联系我们
产品目录
VITL系列
当前位置:
首页
>>>
技术文章
>
技术文章
丙烯酰胺等的配制 -混匀仪技术文章
丙烯酰胺等的配制 -混匀仪技术文章
丙烯酰胺等的配制 -混匀仪技术文章
1、30%丙烯酰胺
(1)配制方法:将29G丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中,加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml,用Nalgene滤器(0.45um孔径)过滤**,查证
该溶液的pH值应不大于7.0,置之不理棕色瓶中保存于室温。
(2)说明:小心丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可通过皮肤吸收,其作用具螺积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作
,因为它还可能会含有少量未聚合材料。
一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1 Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸
以纯化之。在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酸和双丙烯酸。
2、10%过滤酸铵
(1)配制方法:把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4 ℃保存数周。
3、1mol/L 氯化钙
(1)配制方法:在20ml纯水中(Milli-Ce水或相当级别的水)溶解54g Cacl2 ? 6H2O用0.22um滤器过滤**,分装成10ml小份贮存于-20 ℃。
(2)说明:制备感受态细胞时,取出一小份解冻并用纯水稀释至100ml,用Nalgene滤器(0.45um孔径)过滤**,然后聚冷至0℃。
4、1mol/L二硫苏糖醇(DTT)
(1)配制方法:用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤**后分装成1ml小份贮存于-20 ℃。
(2)说明:DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。
5、0.5mol/L EDTA(pH8.0)
(1)配制方法:在800ml水中加入186.1g=水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na ?2H2O ),在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节溶液的pH值至8.0(约需20g Naoh颗粒)然后定容至1L
,分装后高压**备用。
(2)说明:EDTA二钠盐需加入NaoH将溶液的pH值调至接近8.0时,才能完全溶解。
6、10mg/ml溴化乙锭
(1)配制方法:在100ml水中加入1g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容光焕发器或转移至棕色瓶中,保存于室温。
(2)说明:小心:溴化乙锭 是强诱变剂并有中度毒性,使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套,称量染料时要戴面罩。这些溶液使用后应按附录E提供的方法之一进行净化处理
。
7、100mmol/L IPTG W:
配制方法:IPTG为异丙基硫式- β-D-半乳糖苷(分子量为238.3D),在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后,用蒸馏水定容至10ml,用0.22um滤器过滤**,分装成1ml小份贮存于-20℃。
8、1mol/L硫酸酶
(1)配制方法:在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁,用水定容至1L,过滤**。
9、β巯基乙醇(BME)
(1)配制方法:一般得到的是14.4mol/L溶液,应装在棕色瓶中保存于4 ℃;
(2)说明:BME或含有BME的溶液不能高压处理
10、酚/氯仿
(1)配制方法:一般得到的是14.4mol/L Tris ?Cl(pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆盖等体积的0.01mol/L Tris?Cl(pH7.6)液层,保存于4℃。
(2)说明:小心,酚腐蚀性很强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜,穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的皮肤部位应用大量的水清洗,并用
肥皂和水洗涤,忌用乙醇。
o/[NUQSI
11、10mmol/L苯甲基磺酰氟(PMSF)
(1)配制方法:用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml(10mmol/L),分装成小份贮存于-20 ℃,如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L)。
(2)说明:小心:PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸和,吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触3PMSF,应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣服
应予丢弃。PMSF在水溶液中不稳定,应在使用前从贮存液中现用现加入裂解缓冲液中。PMSF在水溶液中的活性丧失速率高于4℃。pH值为8.0时,20umol/L的PMSF溶液的半寿期大约
为35分钟(James,1978),这表明将PMSF溶液调节为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后,可**地予以丢弃。
12、磷酸盐缓冲溶液(PB S)
(1)配制方法:在800ml蒸馏水中溶解8g Nacl、0.2gKcl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCL调节溶液的pH值至7.4加水定容至IL,在15 16f/in 2 (1.034 ×10 5 Pa )高压
.
下蒸汽**20分钟,保存于室温。
13、乙酸钾溶液(用于碱裂解)
(1)配制方法:在60ml 5mol/L乙酸钾溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水,即成钾浓度为3mol/L,而乙酸根浓度为5mol/L的溶液。
14、3mol/L乙酸钠
(1)配制方法:在800ml水中溶解408.1g三水乙酸钠,用冰乙酸调节pH值至5.2或同稀乙烯调节pH值至7.0,加水定容到1L,分装后高压**。
15、5mol/L氯化钠
(1)配制方法:在800ml水中溶解292.2g Nacl加水定容至1L,分装后高压**。
16、10%十二烷基硫酸钠(SDS)
(1)配制方法:在900ml水中溶解100g电泳级SDS,加热至68 ℃助溶,加入几滴浓盐酸调节溶液的pH值至7.2,加水定容至1L,分装备用。
(2)说明:SDS的微细晶粒易于扩散,因此称量时要戴口罩,称量完毕后要**残留在称量工作区和天平上的SDS,10%SDS溶液无须**。
17、20×SSC
(1)配制方法:在800ml水中溶解175.3g Nacl和88.2g柠檬酸钠,加入数滴10mol/L Nach溶液调节pH值至7.0加水定量至1L,分装后高压**。
18、100%三*** =HapCmrx8
(1)配制方法:在装有500g TCA的瓶中加入227ml水,形成的溶液含有100%(W/V)TCA。
19、1mol/L Tris T3
(1)配制方法:在800ml水中溶解121.1g Tris碱,加入浓HCL调节pH值至所需值。
pH HCL
7.4 70ml
7.6 60ml
8.0 42ml
应使溶液冷至室温后方可*后调定pH值,加水定容至1L,分装后高压**。
(2)说明:如1mol/L溶液呈现黄色,应予丢弃,并置备质量更好的Tris。尽管多种类型的电级均不能准确测量Tris溶液的pH值,但仍可向大多数厂商购得适合的电极。Tris溶液的pH值因温度而异,温度每升高1 ℃,pH值大约降低.03个单位。例如:0.05mol/L的溶液在5℃、25℃和37℃时的pH值分别为9.5、8.9和8.6。
20、Tris缓冲液溶液
(1)配制方法:在800ml蒸馏水中溶解8g Nacl、0.2Kcl和3g Tris碱,加入0.015g酚红并用Hcl调pH值至7.4,用蒸馏水定容至1L,分装后在15 1bf/in2(1.034 × 10 5 Pa)高压下
.
蒸汽**20分钟,于室温保存。
(1)配制方法:X-gal为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,用二甲基甲酰胺溶解X-gal配制成20mg/ml的贮存液。保存于一玻璃管或聚丙烯管中,装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏,并应贮存于-20℃,X-gal溶液无须过滤**。
转自生命科学论坛
上一篇:
使用单细胞测序新技术MALBAC技术中美科学家**绘制高覆盖度单精子基因图谱-混匀仪技术文章
下一篇:
基因克隆个人研究总结和实验-混匀仪技术文章
若网站内容侵犯到您的权益,请通过网站上的联系方式及时联系我们修改或删除