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native-PAGE与Blue native PAGE -混匀仪技术文章
native-PAGE与Blue native PAGE -混匀仪技术文章
native-PAGE与Blue native PAGE -混匀仪技术文章
SDS_PAGE大家肯定已经非常熟悉了,是一种*基本的实验技术,可以用来进行蛋白质的分离和鉴定,国内的书籍和教材中也有大量的篇幅来介绍,相对来说关于native-PAGE(天然,非变性PAGE)的介绍较少,笔者在复习考研课程时在南京大学一年的生物化学试题中发现这样一道题“什么是native-PAGE?有什么应用?请比较与SDS-PAGE的区别”,当时笔者只知道SDS_PAGE,但对于native-PAGE则是一无所知,上网查了些资料才有了粗浅的认识,*近看到北京蛋白质研究中心在《分子细胞蛋白质组学》上发表的一篇
解析HBV**靶点
的论文中使用了Two-dimensional Blue Native/SDS-PAGE这种技术,又激起了我对native-PAGE的兴趣,现在再来温习一下。
1.
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)是在不加入SDS 疏基乙醇等变性剂的条件下,对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,可以用于同工酶的鉴定,分析蛋白质复合体,目前在蛋白质学中也有广泛应用。未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷,它们的分离是依据其电泳迁移率的不同和凝胶的分子筛作用,因而可以得到较高的分辨率,尤其是在电泳分离后仍能保持蛋白质和酶等生物大分子的生物活性,对于生物大分子的鉴定有重要意义。
维基百科的解释
http://en.wikipedia.org/wiki/Native_PAGE
2.
Blue-Native PAGE
(BN-PAGE)
Blue-Native PAGE是
Native-PAGE的一种形式,*初被用来在温和条件下分离和鉴定膜蛋白复合物,近年来这种传统技术收到了功能蛋白质组学的重视,因为它能够被用来研究蛋白质相互作用和分离难溶的膜蛋白复合物。在蛋白质组学中,双向电泳和层析技术是*常使用的蛋白质分离技术,而Native-PAGE在经过不断的发展后已经成为了这些经典技术的重要补充。在多数情况下,Native-PAGE可以与**向电泳进行结合,如**向SDS-PAGE,之前提到的那篇论文就是使用了
Two-dimensional Blue Native/SDS-PAGE。
转自生命科学论坛
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