酶标仪一般标准配置四块滤光片,分别是405nm,450nm,490nm,630nm。具有紫外功能的酶标仪还配备有340nm. 酶标仪使用时如何选择测定的波长呢? 目前用于酶联**吸附测定,常使用的标记用酶是辣根过氧化物酶(HRP),对应的底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD)。底物在过氧化氢溶液的存在下,经辣根过氧化物酶作用,分别氧化为2,2,—二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。 邻苯二胺(OPD)的氧化产物DAB, 在pH值为5.0左右时,在450nm波长处有大吸收,此时可用450nm的滤光片测定吸光值。当加入强酸作为终止试剂终止反应时,pH值降到接近0,此时大吸收波长移至492 nm,此时可用492nm的滤光片测定吸光值。 四甲基联苯胺(TMB)的氧化产物联苯醌,一般在波长为450nm处有大消光系数。使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min,便于检测。 因此,450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定常用的。有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片,影响不大。 除了这两个基本滤光片外,考虑到双波长比色的需要,还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片,双波长比色主要用于消除非特异干扰的影响。 如果实验需要用酶标仪作微量生化测定,就需要扩展紫外检测功能,此时需要一个340 nm波长滤光片。 总之,以上介绍的是常用的几个波长的滤光片,用户还可以根据自己的需求选择其他波长的滤光片。一般各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件,可以同时安装6~8片滤光片,可以满足用户的不同需求。 华东生物器材网(www.jp1718.com)是上海金鹏旗下网站。本网是专业的生化器材网站,集生产、制造、销售于一体。优势产品有紫外分析仪、核酸蛋白检测仪、凝胶成像分析系统、低压液相色谱分离仪、自动部分收集器、梯度混合器、旋转蒸发器等生物仪器,是销售生化器材品种**,规模庞大的专业企业。 上海金鹏分析仪器有限公司 www.jp1718.com 电话: 61425398 36162366 手机: QQ:964122960,765695826, 842727501, 2460311703, 2431022418,170324176 传真: 地址:上海市真陈路1398弄15号 邮编:200444