要获得微生物纯培养,必须避免杂菌污染,因此对所用器材及工作场所进行**与**。对培养基而言,更是要进行严格的**。对培养基一般采取高压蒸汽**,一般培养基用1.05kg/cm2,121.3℃条件下维持15~30min可达到**目的。 在高压蒸汽**过程中,长时间高温会使某些不耐热物质遭到破坏,如使糖类物质形成氨基糖、焦糖,因此含糖培养基常在0.56kg/ cm2,112.6℃15~30min进行**,某些对糖类要求较高的培养基,可先将糖进行过滤**或间歇**,再与其他已**的成分混合;长时间高温还会引起磷酸盐、碳酸盐与某些阳离子(特别是钙、镁、铁离子)结合形成难溶性复合物而产生沉淀,因此,在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时,常需在培养基中加入少量螯合剂,避免培养基中产生沉淀,常用的螯合剂为乙二胺四乙酸(EDTA)。还可以将含钙、镁、铁等离子的成分与磷酸盐、碳酸盐分别进行**,然后再混合,避免形成沉淀;高压蒸汽**后,培养基pH会发生改变(一般使pH降低),可根据所培养微生物的要求,在培养基**前后加以调整。
在配制培养基过程中,泡沫的存在对**处理极不利,因为泡沫中的空气形成隔热层,使泡沫中微生物难以被杀死。因而有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生,或适当提高**温度。
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