如何制备常用培养基

发布时间：2015-01-21

如何制备常用培养基
培养基制备（按1000ml计）
1、营养肉汤（Nutrient broth）培养基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，加水至1000ml，pH7.2~7.4
2、营养琼脂培养基(Nutrient agar)培养基: 牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15~20g,加水至1000ml，pH7.2~7.4
3、肉汁葡萄糖培养基: 牛肉膏3g,，蛋白胨10g，NaCl 5g，葡萄糖20g,琼脂15~20g,，pH7.2~7.4
4、察氏培养基:NaNO32g,K2HPO4 1g,KCl 0.5g,MgSO4?7H2O 0.5g,FeSO4?7H2O 0.01g,蔗糖30g, 琼脂15~20g,加水至1000ml，pH自然
5、高氏一号培养基:可溶性淀粉20g,KNO31g,NaCl 0.5g, K2HPO4 0.5g, MgSO4?7H2O 0.5g,FeSO4?7H2O 0.01g, 琼脂20g,加水至1000ml，pH7.2~7.4。此培养基适用于多数放线菌,孢子生长良好,宜保藏菌种。制法:先用少量冷水将淀粉调成糊状,再取700ml水盛于烧杯中,在电炉上加热,沸腾时边搅拌边将淀粉糊倒入,待透明后再将其他成分加入,*后补足水分至1000ml.
6、无碳基础培养基(NH4)2SO4 5g,KH2PO4 1g,NaCl 0.1g, MgSO4?7H2O 0.5g,CaCl2 0.1g,酵母膏0.2g, 加蒸馏水至1000ml,pH6.5.加2%水洗琼脂即成固体培养基.于6.86×104Pa压力下**20min.此培养基适用于测定酵母菌对碳源的利用(加待测碳源2%).
7、无氮基础培养基:葡萄糖20g, K2HPO4 1g, MgSO4?7H2O 0.5g,酵母膏 0.1g或20%豆芽汁20ml,水洗琼脂20g,加无氨蒸馏水至1000ml.pH6.5. 于6.86×104Pa压力下**20min.此培养基适用于测定酵母菌对氮源的利用(加待测氮源0.5%).
8、营养缺陷型筛选用培养基
⑴ 普通营养肉汤培养基
⑵ 加倍营养肉汤培养基: 牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，加水至500ml,，pH7.2
⑶ Vogel 50×(即浓缩50倍): MgSO4?7H2O 10g,柠檬酸100g,NaNH4HPO4?4H2O175g,KH2PO4?2H2O599.88g,K2HPO4?3H2O656.31g,加蒸馏水至1000ml.配置时先加水500ml,加热使药品溶解后,再定容1000ml.配好后放入冰箱备用.
⑷ 固体基本培养基: Vogel 50×20ml,葡萄糖20g,水洗琼脂20g,加蒸馏水至1000ml,pH7.0,
⑸ 2氮液体基本培养基:K2HPO4 7g,KH2PO4 3g,柠檬酸纳?3H2O 5g,MgSO4?7H2O 0.1g,,(NH4)2SO4 2g,葡萄糖20g,加蒸馏水至1000ml,pH7.0, 于4.9×104Pa压力下**20~30min.
⑹ 无氮液体基本培养基:在⑸的配方中除去(NH4)2SO4即可.
⑺ 混合氨基酸和混合维生素的配置:将氨基酸分为七组(如下表),其中六组各有6种氨基酸,每种氨基酸等量研细,充分混匀.若所选的氨基酸为DL型,则用量加倍.第七组只有一中氨基酸.第八组为混合维生素.

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