3.1 外观控制制备好的培养基应有相应的颜色,一般的应澄清、无浑浊、无沉淀。使用前应检查培养基的颜色是否发生变化,是否蒸发/脱水。
3.2 污染控制 从每批制备好的培养基中选取部分进行污染调试 ( 无菌试验 ) ,确定无微生物生长方可使用。
3.3 性能调试
3.3.1 调试菌株选择调试菌株是具有其代表种的稳定
特性并能有效证明实验室特定培养基*佳性能的一套菌株,应来自国际/国家标准菌种保藏中心 ATCC 标准菌株,菌株的选择参考卫生行业标准 WS/T232-2002 《商业性质量检验规程》。
3.3.2 定量调试方法改良 Miles-Misra 法调试菌株过夜培养物 10 倍递增稀释;调试平板和参照平板划分为 4 个区域并标记;从*高稀释度开始,分别滴一滴稀释液于试验平板和对照平板标记好的区域;将稀释液涂满整个 1/4 区域, 37 ℃培养 18 小时;对易计数的区域计数,按公式计算生长率 ( 生长率 = 待测平板上得到的菌落总数/参考培养基平板上获得的菌落总数 ) 。非选择性培养基上目标菌的生长率应不低于 0.7 ,该类培养基应易于目标菌生长;选择性培养基上目标菌的生长率应不低于 0.1 。
3.3.3 半定量调试方法 改进的划线法接种法平板分 ABCD 四区,共划 16 条线,平行线大概相隔 0.5cm ,每条有菌落生长的划线记作 1 分,每个仅一半的线有菌落生长记作 0.5 分,没有菌落生长或生长量少于划线的一半记作 0 分,分数加起来得到生长指数 G 。目标菌在上应呈现典型的生长,而非目标菌的生长应部分或完全被抑制, 目标菌的生长指数 G 大于 6 时,培养基可接受。
3.3.4 定性调试方法平板接种观察法用接种环取调试菌培养物,在调试培养基表面划平行直线。按标准中规定的培养时间和温度对接种后的平板进行培养,目标菌应呈现良好生长,并有典型的菌落外观、大小和形态,非目标菌应是微弱生长或无生长。
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