巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR),使用两对(而非一对)PCR引物扩增完整的片段。**对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。**对引物称为巢式引物(因为他们在**次PCR扩增片段的内部)结合在**次PCR产物内部,使得**次PCR扩增片段短于**次扩增。
由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从而降低了扩增多个靶位点的可能性(因为与两套引物都互补的引物很少)增加了检测的敏感性;又有两对PCR引物与检测模板的配对,增加了检测的可靠性。 由于**套引物位于**轮PCR产物内部,而非目的片断包含两套引物结合位点的可能性极小,因此**套引物不可能扩增非目的片断。这种巢式PCR扩增确保**轮PCR产物几乎或者完全没有引物配对特异性不强造成的非特异性扩增的污染。
巢式PCR反应模式图
实验材料
试剂、试剂盒
1. 图解