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叶绿素提取技术的改进以及发展

叶绿素提取技术的改进以及发展
　　叶绿体色素的提取以及含量的测定是植物生理生化研究的重要试验。叶绿素含量的测定在农业中大量的推广，叶绿素含量的准确测定能够衡量作物的*终产量，同时还能够准确的指导氮肥的施加量，相关的实验证明使用叶绿素检测仪知道氮肥的施加能够做到不降低作物产量的同时减少使用10%的氮肥，叶绿素含量的测定同时还可以使用比较传统的方法，先使用有机物质对植物叶片中叶绿素含量的提取，在使用分光光度计进行测定。叶绿素的提取方法在今年来进行了很大程度上的改进。
　　方案1：称取1 g鲜叶片，切成小块，放在研钵中加80%丙酮(V/V)40mL，把组织研磨成匀浆，小心地将绿色液体通过漏斗过滤到100 mL容量瓶中；再用30 mL80%丙酮研磨成匀浆，至滤液无色为止(注意冲洗漏斗边缘的叶绿素)；用80%的丙酮定容至100 mL、
　　方案2：取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料，擦净组织表面污物，剪碎(去掉中脉)、混匀；称取剪碎的新鲜样品0.2g共3份，分别放入研钵中，加入少量石英砂和碳酸钙粉及2~3 mL 95%(或80%丙酮)的乙醇，研磨成匀浆，再加乙醇10mL，继续研磨至组织变白。静置3~5 min；取滤纸1张，置漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，过滤到25mL棕色容量瓶中，用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次，*后连同残渣一起倒入漏斗中；用滴管吸取乙醇将滤纸上的叶绿素全部洗入容量瓶中，直至滤纸和残渣中无绿色为止，用乙醇定容至25mL，摇匀。
　　以上两种方法均是存在一定的缺陷，对测定的结果有很大的影响性，主要存在耗时、耗力，测定过程对叶绿素含量的破坏性强，*终直接影响到测定的准确度，因而测定的过程中进行了很大程度上的改变，具体如下：
　　取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料，擦净组织表面污物，去中脉剪碎混匀，准确称取鲜样0.2g，3次重复，分别放入研钵中，加入少量石英砂和碳酸钙粉及2~3 mL95%的乙醇(或80%丙酮)，在弱光下的冰浴中研磨成匀浆，转移至50 mL的烧杯中，再将提取液转移至50mL棕色容量瓶中，用一定量的乙醇冲洗研钵、研棒、烧杯及残渣数次，洗涤液连同残渣全部转移至容量瓶后定容。容量瓶置于4℃的冰箱中提取4~24h。测定时将容量瓶摇匀，干过滤于洁净干燥烧杯中(*初的少量滤液可用于润洗烧杯数次)。该方法不论是在提取的时间上等均有很大的进展，为叶绿素的提取技术发展起到了一定的作用
本文来源：http://www.ny-17.com/news/838.html

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