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分光光度法测定各叶绿素含量的方法

分光光度法测定各叶绿素含量的方法
　　施加氮肥是作物产量提升的一种方法，也正是因为如此，我国在粮食等作物产量提升的同时氮肥的施用量也是位居****，出现氮肥利用率低下的现象，也正是因为如此，国家开始注重氮肥的施加，测土配方施肥是一种方法，同时还有就是通过使用叶绿素计进行测定叶绿素含量一次进行判断氮肥的缺少量，相应的是验证明，使用叶绿素计测定的SPAD值 进行合理施加氮肥，能够做到在不降低产量的同时减少10% 的产量，在实际生产中多会采用叶绿素计进行测定，进行校对时主要借助传统的分光光度法进行测定，分光光度法测定叶绿素的方法具体如下：
　　叶片摘下并立即保鲜，沿主脉取一半叶片，用打孔器在叶片上打样，取样0.2g放入三角瓶，采用化学方法丙酮–乙醇1:1混合液，密封，放于黑暗处48小时，然后用722分光光度计于645nm/663nm处比色，得OD值，并计算出叶片叶绿素a（Ca）、叶绿素b（Cb）和叶绿素总量（Ct）。将另一半叶片烘干、制样，以H2SO4–H2O2法消化，在BUCHI–350全自动凯氏定氮仪上测定叶片含氮量。
　　叶绿素计算公式如下：
　　Ca＝12.7 D663－2.59D645
　　Cb＝22.9 D645－4.67 D663
　　Ct＝Ca＋Cb本文来源：http://www.ny-17.com/

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