超敏ECL化学发光试剂盒使用方法：1.印迹膜制备 按常规方法完成SDS-PAGE和电转膜操作，适当的封闭非常重要。可以通过标记一抗或二抗的手段引入HRP，一般采用市售的HRP二抗交联物。仔细地淋洗对于降低背景非常重要，在与HRP交联物温育后，膜片更需仔细洗涤，所有步骤均在室温下完成。
2.超敏ECL化学发光试剂盒化学发光试剂的配置 在使用前等量混合A液和B液，混合后尽快使用。将膜片置混合液中于室温下振荡温育2分钟，每平方厘米膜片至少使用0.1-0.2ml以覆盖全膜片。
3.蛋白信号显现
1).用平头镊钳住膜片，垂直置于吸水纸以吸去过量试剂。
2).置膜片于二层保鲜膜之间，小心赶尽气泡。
3).将膜片吸附蛋白面朝上，置于X光片盒中。
4).于暗室中压上X光片。
5).根据信号的强弱适当调整曝光时间，一般为1min或5min，也可选择不同时间多次压片，以达*佳效果。显影冲洗。
6).调节曝光时间，再次曝光显影。
4、超敏ECL化学发光试剂盒膜的重复使用：
配置62.5mM Tris-Hcl,PH6.7,2%SDS, 7ml/100ml的巯基乙醇的溶液，膜放入后，70?C振荡水浴30分钟。再用TBST或PBST缓冲液洗脱，*后用BSA（牛血清白蛋白）或牛奶封闭。
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