荧光染料是指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。25%的荧光效率是电致激发的限制,那么为何荧光染料材料的量子效率不超过25%?
电子和空穴复合的时候,电子自旋之间会发生耦合,共有四种可能的耦合方式,其中三种属于三重态的耦合方式,一种是单重态的耦合方式,电子空穴复合时,随机选择一种,概率上讲,有四分之一的选中了单重态,因而荧光量子产率的上限就是25%。
电致激发,大致是在电场作用下,电子和空穴复合形成激子,这里的激子就是激发态的,它不是从基态跃迁上来的。
荧光染料材料的量子效率不超过25%,我们大家都应该了解清楚,希望大家能够清楚认识这点。
荧光染料是指某一波长的光波后发射出另一波长大于吸收光的光波的物质,多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物。
常用荧光染料具体介绍如下:
(一)**荧光标记常用的荧光染料
FITC(异硫氰酸荧光素):绿色530nm
PE(藻红蛋白):橙黄色575nm
488nm波长的氩离子激光激发
APC(别藻青蛋白):红色660nm
630nm波长的氦氖激光或红色二极管激光激发
PerCP(多甲藻黄素叶绿素蛋白):深红色675nm
PI(碘化丙啶):橙红色620nm
(二)细胞自发荧光
自发荧光信号为噪声信号,在多数情况下会干扰对特异荧光信号的分辨和测量。在**细胞化学等测量中,对于结合水平不高的荧光抗体来说,如何提高信噪比是个关键。
(三)**荧光标记
常用的标记染色为直接**荧光染色和间接**荧光染色。在进行双参数或多参数分析时,常常需要进行荧光抗体的组合标记,目前已经有双色、三色以及四色标记。