人体的非典型三肽化合物，你知道吗？

谷胱甘肽(GSH)，一种非典型的三肽化合物，几乎存在于身体的每一个细胞中，它对人体的重要性就不言而喻了。快速检测谷胱甘肽的试剂，百萤生物（Biolite）为您推荐AAT Bioquest经过多年研发，被各大科研机构成熟运用的GSH/GSSG比率检测试剂盒。

谷胱甘肽，是由三个氨基酸（半胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸）组成的短肽，含有γ-酰胺键和巯基。它具有抗氧化作用和**作用，能够帮助人体保持正常的**系统功能。它分为两种形态：还原型（G-SH）；氧化型（G-S-S-G）。

（左：还原型谷胱甘肽，右：氧化型谷胱甘肽。图片来源于网络）

在健康细胞中，超过90％的谷胱甘肽总量为还原型（GSH）。当细胞暴露于增加的氧化应激水平时，GSSG积累并且GSSG与GSH的比例增加。 GSSG-GSH比例增加是氧化应激的指标。监测生物样品中还原和氧化的GSH对于评估细胞/组织对氧化和自由基介导的细胞损伤的氧化还原和**状态是必不可少的。    

百萤生物（Biolite）出售的Amplite™荧光法谷胱甘肽GSH/GSSG比率检测试剂盒是一种超灵敏、可定量分析细胞样品中GSH含量的试剂盒。该试剂盒使用专有的非荧光染料，与GSH反应后变为强荧光。使用一步荧光法，可在100μL测定体积（10 nM）中检测少至1皮摩尔的GSH或GSSG。它可以在96孔或384孔微量滴定板下进行实验，并且容易适应自动化而无需分离步骤。信号可通过荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 520nm处轻松读取。

（表格为试剂盒各组分）

该试剂盒96孔检测样品数据分析

图1.使用Gemini荧光酶标仪（Molecular Devices），在具有Amplite ^TM荧光谷胱甘肽GSH / GSSG比率测定试剂盒的黑色96孔板中测量降低的GSH剂量反应。 向每个孔中加入50μLGSH标准品（0.01至5μM）或空白对照，然后加入50μLGSHAssay Mixture。 孵育30分钟后，在Ex / Em = 490 / 520nm处测量荧光强度。

图2. 使用Gemini荧光酶标仪（Molecular Devices），在黑色96孔板中用Amplite ^TM荧光谷胱甘肽GSH / GSSG比率测定试剂盒测量总GSH剂量反应。 将50μLGSSG标准品（0.01至5μM），含GSH的样品或空白对照加入每个孔中，然后加入50μL总GSH反应混合物。 孵育30分钟后，在Ex / Em = 490 / 520nm下测量荧光强度。

                  Panel A (GSH)                                                 Panel B (GSSG)

GSH校准曲线如图1所示：Log（y）= 2.1362 + 0.89694Log（x）（1）

总GSH校准曲线如图2所示：Log（y）= 2.1231 + 0.8166Log（x）（2）

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