Fluo-3和Fluo-4是*常用的可见光可激发的钙离子指示剂。然而,Fluo-3 AM和Fluo-4 AM在酯酶水解后仅在活细胞中发生中度荧光,并且需要苛刻的细胞负载条件来*大限度的提高细胞钙反应。Fluo-8®染料已被开发用于改善细胞负载和钙响应,同时保持方便的Fluo-3和Fluo-4光谱波长,*大激发波长为~490 nm,*大发射波长为~520 nm。对于细胞培养,FLUO-8 ® AM只需要在室温下培养,而Fluo-3 AM和的Fluo-4 AM则需要在37℃温育需要。此外,Fluo- 8®AM比Fluo-4 AM亮2倍,比Fluo-3 AM亮4倍。AAT Bioquest提供了一系列不同钙亲和力出色的Fluo-8 ®试剂。
Fluo-8® AM的主要特点:
• 在室温条件下,比Fluo-3 AM和Fluo-4 AM更快,更容易装入细胞。
• 比细胞中的Fluo-3 AM和Fluo-4 AM 更亮。
• 与Fluo-4 AM的光谱几乎完全相同,十分方便。
图1.用Fluo-8®AM(货号 21080)和Fluo-4 AM在HEK-293细胞中测量卡巴酚剂量反应。HEK-293细胞在96孔黑壁/透明底肋片中以40000个细胞/100μl/孔接种过夜。去除生长培养基,在室温下用100μl含Fluo-8®AM或Fluo-4 AM的染色液培养细胞1小时。通过NOVOstar添加卡巴胆碱(25μL/孔)以达到*终指示的浓度。在Ex / Em = 490 / 525nm下测量荧光信号。用Fluo-8测得卡巴胆碱的EC50 ® AM为约1.2μM。
图2.在Costar 96孔黑壁/透明底板中以每孔100μL每孔40,000个细胞接种U2OS细胞过夜。去除生长培养基,37℃的HHBS中将细胞用100μL的4μM的Fluo-3 AM,Fluo-4 AM和Fluo-8® AM(货号:21080)孵育1小时。用200μLHHBS洗涤细胞两次,然后使用FITC通道用荧光显微镜成像。
表2. Fluo-8®钙离子指示剂
货号
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产品名称
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规格
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价格
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21080
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F1uo-8 ®,AM
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1mg
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2100
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21081
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Fluo-8 ®,AM
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5x50 ug
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1140
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21082
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Fluo-8 ®,AM
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10*50ug
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2100
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21083
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Fluo-8 ®,AM
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20*50ug
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3540
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21086
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Fluo-8®,钠盐
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1mg
|
3540
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21087
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Fluo-8®,钾盐
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1mg
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3540
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21088
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Fluo-8®,钠盐
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10x50 ug
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2340
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21089
|
Fluo-8®,钾盐
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10*50ug
|
2340
|
21090
|
Fluo-8H™, AM
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1mg
|
3540
|
21091
|
Fluo-8H™, AM
|
10*50ug
|
2340
|
21095
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Fluo-8H™, 钠盐
|
10*50ug
|
2340
|
21096
|
Fluo-8L™, AM
|
1mg
|
3540
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21097
|
Fluo-8L™, AM
|
10*50ug
|
2340
|
21098
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Fluo-8L™, 钠盐
|
10*50ug
|
2340
|
21099
|
Fluo-8L™, 钠盐
|
1mg
|
3540
|
21100
|
Fluo-8L™, 钾盐
|
10*50ug
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2340
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21101
|
Fluo-8L™, 钾盐
|
1mg
|
3540
|
21102
|
Fluo-8FF™,钾盐
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10*50ug
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2340
|
21103
|
Fluo-8FF™,钾盐
|
1mg
|
3540
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21104
|
Fluo-8FF™, AM
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10*50ug
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2340
|
21105
|
Fluo-8FF™, AM
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1mg
|
3540
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36307
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Screen Quest™Fluo-8钙检测试剂盒 *适合于难检测细胞系
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1 Plate
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1140
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36308
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Screen Quest™Fluo-8钙检测试剂盒 *适合于难检测细胞系
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10Plate
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4140
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36309
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Screen Quest™Fluo-8钙检测试剂盒 *适合于难检测细胞系
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100Plate
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29400
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36314
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Screen Quest 免洗Fluo-8钙检测试剂盒
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1 Plate
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1140
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36315
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Screen Quest 免洗Fluo-8钙检测试剂盒
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10Plate
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4140
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36316
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Screen Quest 免洗Fluo-8钙检测试剂盒
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100Plate
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35400
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