西安百萤生物科技有限公司
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主营:百萤生物围绕荧光发光、荧光标记、荧光探针等技术进行产品研发,公司产品广泛用于核酸蛋白定量、细胞凋亡研究、细胞信号通路研究、细胞及线粒体膜电位检测、细胞器染色、活体示踪、抗体标记等科研领域。
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未来已来——光谱流式大放异彩

发布时间:2019-05-30

流式细胞仪,一项可以推动医学、生命科学快速发展的发明,与传统的**荧光、**印迹相比,流式的优点很多:1.阳性细胞比例的确定2.同时检测多种蛋白3.简便的蛋白定量操作4.速度与灵敏度极高。


流式细胞仪也却是一种让人既爱又恨的仪器。爱在它可以自动分析、筛选细胞,快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来恨就恨在荧光补偿实在是一个非常麻烦的过程。文献中提到过,哺乳动物细胞的自发荧光来源很复杂,如烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 NAD,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADPH,黄素等。而且除了自发荧光,细胞固定液、染液也有可能会导致荧光改变。这些杂七杂八的荧光混在一起对各个波段的荧光检测有很大的影响,再加上这些自发荧光的光谱通常都很宽,与大部分荧光染料光谱重合,对荧光补偿来说更是难上加难。

哪里有困难,哪里就有解决办法,*近听到公司大牛提到光谱流式细胞仪已超越传统流式,可以解决荧光补偿的问题,可能在未来成为流式的主导,我也是一个激灵,想起自己当初做实验时的满面愁容,我怀着激动的心情,详细的了解了一下光谱流式。(注:公司不售流式,仅做科普,不是广告。)

采用棱镜模组分光和砖利技术 32 联排 PMT,实现 420-800nm 波长范围内光谱荧光信号检测。该技术的实现也突破了传统流式的诸多限制,标志着光谱流式时代的到来!

常规流式与光谱流式对比


如何才能破解自发荧光干扰?



全光谱流式细胞仪实现对细胞自发荧光从 420nm-800nm 波长范围光谱扫描,软件可以帮助我们快速的找出并计算得到不同的自发荧光的光谱线。系统将这些自发荧光与染料荧光同时分析;利用自发荧光光谱与染料荧光光谱的差异,结合统计学算法,完成了对染料荧光和自发荧光的拆分。

 

 

说到这里,许多人想,传统流式都用了这么多年了,各种方法早已烂熟于心了,我不想再重新尝试了,这让我不禁想起之前看到的一段话: 多色流式的荧光补偿概念根深蒂固,很多用户向光谱流式转化看起来太痛苦 我不断提出这样的问题:“当我们有机会去除流式细胞仪的这个**的Bug时,为什么我们还要花费这么多时间和精力专注于补偿呢?” 一个又一个教程,一篇又一篇Paper,一个又一个问题。痛苦难道是流式细胞术的必要组成部分吗?——J. Paul Robinson(光谱流式***)。科学使人类进步,同时人类也推动科学进步,做出新的尝试,新的改变,未尝不是一种新的进步呢?改变吧,科研不加班!

百萤生物,是美国AAT Bioquest的中国代理商,出售各类荧光探针/试剂盒,提供各类定制、技术服务,产品涉及:细胞检测生化检测荧光标记探针高通量筛选等,试剂/试剂盒可应用于各类流式细胞仪、酶标仪、显微镜,欢迎咨询、选购!






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