流式细胞仪,一项可以推动医学、生命科学快速发展的发明,与传统的**荧光、**印迹相比,流式的优点很多:1.阳性细胞比例的确定2.同时检测多种蛋白3.简便的蛋白定量操作4.速度与灵敏度极高。
流式细胞仪也却是一种让人既爱又恨的仪器。爱在它可以自动分析、筛选细胞,快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来;恨就恨在荧光补偿实在是一个非常麻烦的过程。文献中提到过,哺乳动物细胞的自发荧光来源很复杂,如烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 NAD,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADPH,黄素等。而且除了自发荧光,细胞固定液、染液也有可能会导致荧光改变。这些杂七杂八的荧光混在一起对各个波段的荧光检测有很大的影响,再加上这些自发荧光的光谱通常都很宽,与大部分荧光染料光谱重合,对荧光补偿来说更是难上加难。
哪里有困难,哪里就有解决办法,*近听到公司大牛提到光谱流式细胞仪已超越传统流式,可以解决荧光补偿的问题,可能在未来成为流式的主导,我也是一个激灵,想起自己当初做实验时的满面愁容,我怀着激动的心情,详细的了解了一下光谱流式。(注:公司不售流式,仅做科普,不是广告。)
采用棱镜模组分光和砖利技术 32 联排 PMT,实现 420-800nm 波长范围内光谱荧光信号检测。该技术的实现也突破了传统流式的诸多限制,标志着光谱流式时代的到来!
常规流式与光谱流式对比
如何才能破解自发荧光干扰?
全光谱流式细胞仪实现对细胞自发荧光从 420nm-800nm 波长范围光谱扫描,软件可以帮助我们快速的找出并计算得到不同的自发荧光的光谱线。系统将这些自发荧光与染料荧光同时分析;利用自发荧光光谱与染料荧光光谱的差异,结合统计学算法,完成了对染料荧光和自发荧光的拆分。
说到这里,许多人想,传统流式都用了这么多年了,各种方法早已烂熟于心了,我不想再重新尝试了,这让我不禁想起之前看到的一段话: 多色流式的荧光补偿概念根深蒂固,很多用户向光谱流式转化看起来太痛苦了。 我不断提出这样的问题:“当我们有机会去除流式细胞仪的这个**的Bug时,为什么我们还要花费这么多时间和精力专注于补偿呢?” 一个又一个教程,一篇又一篇Paper,一个又一个问题。痛苦难道是流式细胞术的必要组成部分吗?——J. Paul Robinson(光谱流式***)。科学使人类进步,同时人类也推动科学进步,做出新的尝试,新的改变,未尝不是一种新的进步呢?改变吧,科研不加班!
百萤生物,是美国AAT Bioquest的中国代理商,出售各类荧光探针/试剂盒,提供各类定制、技术服务,产品涉及:细胞检测、生化检测、荧光标记探针、高通量筛选等,试剂/试剂盒可应用于各类流式细胞仪、酶标仪、显微镜,欢迎咨询、选购!