百萤生物为您提供新型红色核酸染料--Gelite red
百萤推出的荧光核酸凝胶染料——syber green、Cyber Orange、Gelite Red、Gelite Green、Gelite orange等染料是对电泳凝胶中的DNA 进行染色的高灵敏试剂,与传统溴化乙锭凝胶染料相比,这些凝胶染料具有更高的灵敏度和更低的背景荧光,而且毒性更低更**。
今天为大家重点介绍由AAT Bioquest研发生产的Gelite red核酸凝胶染料。这种染料是现出售的所有核酸染料中*新的一款,它非常灵敏,可以使用标准的300 nm UV透照仪和Polaroid 667黑白印刷胶片检测凝胶中的DNA。它比市场流行的SYBR Gold、Gel red凝胶染料更敏感,这种敏感源于它自身染料的特性。由于与核酸结合的Gelite red染料在488 nm和〜300 nm处显示*大激发光(*大发射波长为〜610 nm),因此它可与多种仪器兼容,包括紫外线落射式照射和透射照明仪以及蓝色光透射仪,可用于汞弧灯和氩离子激光的凝胶扫描仪。
图1.凝胶染色后Gelite Red和SYBR Gold的比较。 在1x TAE缓冲液中的0.9%琼脂糖中对1 kb Plus DNA Ladder(每泳道200ng和100ng)进行电泳。 随后,将凝胶用1x TAE中的1x Gelite Red或SYBR Gold染色30分钟,并使用带有EtBr滤镜的ChemiDoc MP Imager拍照。
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图2.使用1%琼脂糖凝胶在TBE缓冲液中进行预制凝胶染色时,溴化乙锭(EtBr)和Gelite Red的比较。 从左向右加载100 ng,50 ng,25 ng 1 kb Plus DNA Ladder。 使用带有EtBr滤镜的ChemiDoc MP Imager对凝胶成像。
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染色方案推荐
前染色方案
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使用标准方案准备琼脂糖凝胶溶液。
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加入1X Gelite Red工作溶液,凝胶并充分混合。
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根据您的实验方案运行凝胶。
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使用长路径绿色滤光片(例如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片),使用254 nm透照仪或激光凝胶扫描仪对染色的凝胶进行成像。
后染色方案
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根据标准方案制备琼脂糖凝胶溶液。
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将凝胶放在合适的聚丙烯容器中。轻轻加入足量的Gelite Red工作溶液以浸没凝胶。注意:请勿使用玻璃容器,因为它会吸收染色溶液中的许多染料。
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避开光线,在室温下轻轻搅拌凝胶约30分钟。注意:染色液可以在黑暗中(*好冷藏)保存一周,*多可以重复使用2-3次。
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使用长路径绿色滤光片(例如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片),使用254 nm透照仪或激光凝胶扫描仪对染色的凝胶进行成像。
电泳前的DNA染色
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在电泳前,用1:10,000稀释的染料(TE,TBE或TAE)孵育DNA至少15分钟。
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根据您的实验方案凝胶。
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使用长路径绿色滤光片(例如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片),使用254 nm透照仪或激光凝胶扫描仪对染色的凝胶进行成像。
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