双波长比率钙指示剂选择指南
今天，百萤为大家精选了AAT Bioquest市售的双波长比率钙指示剂，它有哪些产品？它与单波长钙指示剂有什么区别？它有什么优势？如何选择五花八门的双波长比率钙指示剂？感兴趣的小伙伴一起来看看吧！
双波长比率钙指示剂
与单波长钙指示剂相比，双波长比率钙指示剂具有独特的光谱特性，这些光谱特性是响应结合钙而触发的。当与钙结合时，比例指示剂的*佳吸收率或发射波长强度都会发生变化。例如，双激发钙指示剂Fura-2，AM和Fura-8 ，AM在结合和不含钙时均显示两个峰值激发波长。当分别在结合钙的和无钙的峰值激发波长下激发时，钙浓度的增加会引发双激发指示剂的荧光发射强度的增加和减少。
双波长比率钙指示剂的优势：
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比例测定可准确测量细胞内钙浓度
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减少不均匀的染料加载，染料渗漏，光漂白和变化的细胞厚度（在混合种群中常见）的影响
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提供更可靠和可重复的结果
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双重激发或双重发射的指示剂
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活细胞钙分析的细胞渗透形式（与成像，流式细胞仪和微孔板检测（例如HTS）兼容）
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细胞不渗透形式，可通过微量注射，贴片移液器等进行上样
图1.测量CHO-K1细胞的ATP剂量响应。使用Fura-2 AM（#21023）和Fura-8 AM（#21056）。将CHO-K1细胞以40,000个细胞/ 100 µL /孔在黑色96孔板中接种过夜，然后与Fura-2 AM或Fura-8 AM钙测定染料上样溶液孵育1小时。ATP剂量由Flexstation添加。
双波长比率钙指示剂选择指南
下表列出了细胞渗透性双波长比率钙指示剂的规格，其吸收和发射*大值以及其钙解离常数等。请根据自己的实验选择*佳的试剂。(其他形式的试剂如钠盐、钾盐等，请参考下文“相关产品”)
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Fura-2,AM
|
Fura-FF,AM
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Fura-8 ,AM
|
Fura-8FF,AM
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Fura Red,AM
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Indo-1,AM
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Cal Red R525/650,AM
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荧光产生原理
|
与钙结合后比例激发波长发生变化
|
与钙结合后比例发射波长发生变化
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荧光变化原理
|
激发波长变化
|
发射波长变化
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Ex / Em（nm）
（不结合钙时）
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340/510
|
340/510
|
354/524
|
354/524
|
435/650
|
355/475
|
490/660
|
Ex / Em（nm）
（结合大量钙时）
|
380/510
|
380/510
|
415/524
|
415/524
|
471/650
|
355/400
|
490/525
|
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ķ d
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145 nM
|
5.5 µM
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260 nM
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6 µM
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400 nM
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230 nM
|
330 nM
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形式
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AM酯
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AM酯
|
AM酯
|
AM酯
|
AM酯
|
AM酯
|
AM酯
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渗透性
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细胞可渗透
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细胞加载
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通过细胞培养基加载到活细胞中
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规格
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20x50 µg
|
10x50 µg
|
1 mg
|
10x50 µg
|
1 mg
|
20x50 µg
|
10x50 µg
|
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货号
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21023
|
21027
|
21055
|
20620
|
21046
|
21036
|
20591
|
相关产品
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货号＃
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产品名称
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Ex（nm）
|
Em(nm)
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规格
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|
20588
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Cal Red R525 / 650钾盐
|
492
|
650
|
5x50 ug
|
|
20590
|
Cal Red R525 / 650 AM
|
492
|
650
|
1mg
|
|
20591
|
Cal Red R525 / 650 AM
|
492
|
650
|
10x50 ug
|
|
20620
|
Fura-8FF ，AM
|
354
|
525
|
10x50 ug
|
|
20621
|
Fura-8FF ，五钾盐
|
354
|
415
|
10x50 ug
|
|
21020
|
Fura-2，AM * CAS 108964-32-5 *
|
363
|
512
|
1mg
|
|
21021
|
Fura-2，AM *超纯级* * CAS 108964-32-5 *
|
363
|
512
|
1mg
|
|
21022
|
Fura-2，AM * CAS 108964-32-5 *
|
363
|
512
|
50mg
|
|
21023
|
Fura-2，AM *超纯级* * CAS 108964-32-5 *
|
363
|
512
|
20x50 ug
|
|
21025
|
Fura-2，五钾盐* CAS 113694-64-7 *
|
363
|
512
|
1mg
|
|
21026
|
Fura-2，五钠盐
|
363
|
512
|
1mg
|
|
21027
|
Fura-FF，AM* CAS 348079-12-9 *
|
363
|
512
|
10x50 ug
|
|
21028
|
Fura-FF，五钾盐* CAS 192140-58-2 *
|
363
|
512
|
10x50 ug
|
|
21029
|
Fura-FF，五钾盐* CAS 192140-58-2 *
|
363
|
512
|
1mg
|
|
21030
|
Indo-1, AM* CAS 112926-02-0 *
|
346
|
475
|
1mg
|
|
21032
|
Indo-1, AM*超纯级* * CAS 112926-02-0 *
|
346
|
475
|
1mg
|
|
21033
|
Indo-1, AM* CAS 112926-02-0 *
|
346
|
475
|
50mg
|
|
21036
|
Indo-1, AM*超纯级* * CAS 112926-02-0 *
|
346
|
475
|
20x50 ug
|
|
21040
|
Indo-1,五钾盐* CAS 132319-21-9 *
|
346
|
475
|
1mg
|
|
21044
|
Indo-1，五钠盐
|
346
|
475
|
1mg
|
|
21045
|
Fura Red,钾盐
|
458
|
597
|
1mg
|
|
21046
|
Fura Red，AM * CAS 149732-62-7 *
|
458
|
597
|
1mg
|
|
21047
|
Fura Red, 钾盐
|
458
|
597
|
10x50 ug
|
|
21048
|
Fura Red, AM *CAS 149732-62-7*
|
458
|
597
|
10x50 ug
|
|
21050
|
Quin-2，AM * CAS 83104-85-2 *
|
353
|
495
|
1mg
|
|
21052
|
Quin-2四钾盐* CAS 149022-19-5 *
|
353
|
495
|
5mg
|
|
21055
|
Fura-8 ，AM
|
354
|
525
|
1mg
|
|
21056
|
Fura-8 ，AM
|
354
|
525
|
10x50 ug
|
|
21057
|
Fura-8 ，五钾盐
|
354
|
525
|
1mg
|
|
21058
|
Fura-8 ，五钠盐
|
354
|
525
|
1mg
|
|
36320
|
Screen Quest 免洗Fura-2钙检测试剂盒
|
370
|
476
|
10Plates
|
|
36321
|
Screen Quest 免洗Fura-2钙检测试剂盒
|
370
|
476
|
100Plates
|
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