可用于多种生物学应用的花青染料
今天百萤给大家带了的是花青素及其衍生物的介绍和推荐。与其他经典荧光染料相比,花青染料的荧光信号如何?可用于哪些领域?光谱性质是怎样的?效果良好的花青类产品都有哪些?能修饰哪些反应基团?感兴趣的朋友一起来看看吧!
荧光素及其衍生物
“花青”这个名词是来自于聚次甲基组合成染料家族中的,它是一个非系统名称,cyanin一词源自英语单词“ cyan”,通常表示蓝绿色。 花青染料的摩尔消光系数(约150,000至300,000 M-1cm-1)非常大,结合适度的量子产率,使它可以产生极其明亮的荧光信号。 事实证明,花青在许多领域都非常有用,包括成像技术,生物学,激光技术和分析化学等。 AAT Bioquest提供了*多的花青染料集合,它们可用作多种生物学应用的分子探针。 对于某些生物学应用,花青可以有利地替代其他常规染料,例如荧光素和罗丹明。
花青染料Cy3和Cy5
图1.Cy3(左),Cy5(中)和Cy7(右)染料的*大吸光度(虚线)和发射光(阴影区域)。
在花青染料中,*受欢迎的是发出黄绿色荧光(约550 nm激发,约570 nm发射)的Cy3和在红色部分发出荧光(约650 nm激发,约670 nm发射)的Cy5。 由于它们的光谱重叠极小,通常将Cy3和Cy5结合起来进行检测。Cy3可以通过各种荧光仪,成像仪和带有TRITC标准滤波片的显微镜进行检测。 由于其较高的摩尔消光系数,Cy3染料也很容易在电泳凝胶和溶液中用肉眼观察。 Cy5的消光系数也非常高(在凝胶电泳中肉眼可检测到1 nmol),并且在红色部分具有*大的荧光发射峰,因此Cy5成为了红色荧光染料的流行替代品。
光谱性质
产品名称
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激发光线
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Ex / Em(nm)
|
滤波片组
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消光系数(ε)
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量子产率(Φ)
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Cy3
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532nm
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554/568nm
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Cy3 / TRITC
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150,000
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0.15
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Cy5
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633-647nm
|
650/669nm
|
Cy5
|
250,000
|
0.27
|
Cy7
|
730nm
|
754/778nm
|
Cy7
|
250,000
|
0.3
|
磺化与非磺化花青
磺化和非磺化花青染料具有非常相似的荧光特性,在许多应用中它们可以互换使用。染料之间的差别主要在于它们的溶解度。在标记生物分子之前,非磺化花青必须溶解在有机溶剂中,如DMF或DMSO。而磺化花青可用于水性条件(带电荷的磺酸盐基团可减少染料和共轭物的聚集)。为了通过对水或水缓冲液的透析纯化,必须使用磺化花青有效去除未反应的染料。通过凝胶过滤、色谱或电泳纯化对磺化和非磺化菁都是合适的。
表2.磺化和非磺化Cy3,Cy5和Cy7染料的光谱比较。
|
Cy3
|
Cy5
|
Cy7
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形式
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磺化
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非磺化
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磺化
|
非磺化
|
磺化
|
非磺化
|
Ex / Em(nm)
|
554/568
|
650/669
|
754/778
|
过滤片组
|
Cy/ TRITC
|
Cy5
|
Cy7
|
ε(消光系数 cm-1M-1)
|
150,000
|
140,000
|
250,000
|
230,000
|
250,000
|
250,000
|
Φ(荧光量子产率)
|
0.10
|
0.07
|
0.27
|
0.16
|
0.12
|
0.2
|
货号
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263
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191
|
268
|
195
|
161
|
198
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花青产品类型
我们提供多种花青产品选择,包括用于标记生物分子,缀合物,指示剂等的活性染料和结合试剂盒。
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花青抗体/蛋白标记试剂盒
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用于细胞凋亡检测的Annexin V缀合物
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串联染料
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DIGE花青染料
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花青标记的酪胺
花青反应性染料
用于修饰以下反应基团的Cy染料标记的化学试剂:
花青染料标记的荧光二抗缀合物
从多种花青标记的荧光二抗和链霉亲和素偶联物中选择,用于一抗的信号放大检测:
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