西安百萤生物科技有限公司
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主营:百萤生物围绕荧光发光、荧光标记、荧光探针等技术进行产品研发,公司产品广泛用于核酸蛋白定量、细胞凋亡研究、细胞信号通路研究、细胞及线粒体膜电位检测、细胞器染色、活体示踪、抗体标记等科研领域。
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用于多种生物学应用的花青染料

发布时间:2020-06-02

可用于多种生物学应用的花青染料

今天百萤给大家带了的是花青素及其衍生物的介绍和推荐。与其他经典荧光染料相比,花青染料的荧光信号如何?可用于哪些领域?光谱性质是怎样的?效果良好的花青类产品都有哪些?能修饰哪些反应基团?感兴趣的朋友一起来看看吧!


荧光素及其衍生物

“花青”这个名词是来自于聚次甲基组合成染料家族中的,它是一个非系统名称,cyanin一词源自英语单词“ cyan”,通常表示蓝绿色。 花青染料的摩尔消光系数(约150,000至300,000 M-1cm-1)非常大,结合适度的量子产率,使它可以产生极其明亮的荧光信号。 事实证明,花青在许多领域都非常有用,包括成像技术,生物学,激光技术和分析化学等。 AAT Bioquest提供了*多的花青染料集合,它们可用作多种生物学应用的分子探针。 对于某些生物学应用,花青可以有利地替代其他常规染料,例如荧光素和罗丹明。


花青染料Cy3和Cy5

图1.Cy3(左),Cy5(中)和Cy7(右)染料的*大吸光度(虚线)和发射光(阴影区域)。

在花青染料中,*受欢迎的是发出黄绿色荧光(约550 nm激发,约570 nm发射)的Cy3和在红色部分发出荧光(约650 nm激发,约670 nm发射)的Cy5。 由于它们的光谱重叠极小,通常将Cy3和Cy5结合起来进行检测。Cy3可以通过各种荧光仪,成像仪和带有TRITC标准滤波片的显微镜进行检测。 由于其较高的摩尔消光系数,Cy3染料也很容易在电泳凝胶和溶液中用肉眼观察。 Cy5的消光系数也非常高(在凝胶电泳中肉眼可检测到1 nmol),并且在红色部分具有*大的荧光发射峰,因此Cy5成为了红色荧光染料的流行替代品。

光谱性质

产品名称 激发光线 Ex / Em(nm) 滤波片组 消光系数(ε) 量子产率(Φ)
Cy3 532nm 554/568nm Cy3 / TRITC 150,000 0.15
Cy5 633-647nm 650/669nm Cy5 250,000 0.27
Cy7 730nm 754/778nm Cy7 250,000 0.3

磺化与非磺化花青

磺化和非磺化花青染料具有非常相似的荧光特性,在许多应用中它们可以互换使用。染料之间的差别主要在于它们的溶解度。在标记生物分子之前,非磺化花青必须溶解在有机溶剂中,如DMF或DMSO。而磺化花青可用于水性条件(带电荷的磺酸盐基团可减少染料和共轭物的聚集)。为了通过对水或水缓冲液的透析纯化,必须使用磺化花青有效去除未反应的染料。通过凝胶过滤、色谱或电泳纯化对磺化和非磺化菁都是合适的。

表2.磺化和非磺化Cy3,Cy5和Cy7染料的光谱比较。


Cy3 Cy5 Cy7
形式 磺化 非磺化 磺化 非磺化 磺化 非磺化
Ex / Em(nm) 554/568 650/669 754/778
过滤片组 Cy/ TRITC Cy5 Cy7
ε(消光系数 cm-1M-1) 150,000 140,000 250,000 230,000 250,000 250,000
Φ(荧光量子产率) 0.10 0.07 0.27 0.16 0.12 0.2
货号 263 191 268 195 161 198

花青产品类型

我们提供多种花青产品选择,包括用于标记生物分子,缀合物,指示剂等的活性染料和结合试剂盒。

  • 花青抗体/蛋白标记试剂盒
  • 用于细胞凋亡检测的Annexin V缀合物
  • 串联染料
  • DIGE花青染料
  • 花青标记的酪胺

花青反应性染料

用于修饰以下反应基团的Cy染料标记的化学试剂:

巯基 羰基 点击化学
  • 琥珀酰亚胺酯
  • 马来酰亚胺
  • 酰肼
  • 叠氮化物
  • 炔烃
  • 四嗪
  • 反式环辛烯

花青染料标记的荧光二抗缀合物

从多种花青标记的荧光二抗和链霉亲和素偶联物中选择,用于一抗的信号放大检测:

山羊抗小鼠IgG 山羊抗兔IgG 链霉亲和素
  • Cy3
  • Cy5
  • Cy7
  • Cy3
  • Cy5
  • Cy7
  • APC-Cy7
  • Cy3
  • Cy5
  • Cy7
  • RPE-Cy7

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