DNA编码所有遗传信息,是创造所有生物生命的蓝图。它充当遗传物质在世代之间传递的存储设备,RNA充当DNA中存储的蓝图的读取器。储存在DNA中的遗传信息由RNA携带,在核糖体形成蛋白质的过程中充当信使。这整个过程称为分子生物学的“中心教条”。由于核酸分析的范围继续扩大,在核酸检测方法的选择上也是五花八门。影响检测方法选择的关键因素包括稳定性、灵敏度、速度和方便性,以及检测试剂和检测系统的总成本。核酸超灵敏分析的原因包括单细胞和稀有细胞的遗传物质分析,如母体循环中的滋养细胞,以及单拷贝基因检测。此外,更好的检测方法可以提供一种需要较少扩增周期的分析途径,或者消除核酸扩增反应的多周期方案(例如,PCR)。尽管许多检测技术,如基于化学发光的检测技术,在未来可能会发挥重要作用,但目前荧光技术仍然是核酸分析中应用*广泛的检测技术。
DNA和RNA定量试剂
Helixyte 绿色dsDNA定量试剂(Cat#17597)和StrandBrite 绿色RNA定量试剂(Cat#17611)分别对双链DNA和单链RNA进行了优化。它们对核酸有很高的亲和力,对结合核酸有极大的荧光增强作用,使得在几分钟内直接检测复杂溶液中微量核酸成为可能,而且一般不会受到其他生物分子的干扰。
图1.小牛胸腺DNA中使用Helixyte 绿色和PicoGreen进行DNA定量。由图看出Helixyte 绿色和PicoGreen 具有几乎相同的性能。
Helixyte Green是一种出色的核酸定量试剂,与dsDNA结合后可显著增强荧光。它具有与PicoGreen®相同的光谱特性,因此是PicoGreen®的**替代品(PicoGreen®是Invitrogen的商标)。它是可用于定量溶液中DNA的*敏感的染色剂之一。使用Helixyte Green,您可以在ssDNA,RNA和游离核苷酸存在的情况下选择性地检测低至25 pg / ml的dsDNA。该测定法在三个数量级上是线性的,并且几乎没有序列依赖性,使您能够准确地测量来自多种来源的DNA,包括基因组DNA,病毒DNA,微量制备DNA或PCR扩增产物。
在进行Northern杂交分析、S1核酸酶分析、RNase保护分析、cDNA文库制备、反转录PCR之前,检测和定量少量RNA对于多种分子生物学过程非常重要,例如测量体外转录RNA的产量和测量RNA浓度。测量核酸浓度*常用的技术是在260nm处测定吸光度,吸光度法的主要缺点是蛋白质、游离核苷酸和其他紫外线吸收化合物的干扰,但使用敏感的荧光核酸试剂可以缓解这种干扰问题。StrandBrite RNA定量试剂是一种用于溶液中RNA定量的超灵敏荧光核酸染料。StrandBrite RNA定量试剂可以用荧光酶标仪或荧光分析仪检测到低至5ng/mL的RNA。
Helixyte 绿色 dsDNA和StrandBrite 绿色 RNA定量试剂的优势:
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高灵敏度:Helixyte 绿色和StrandBrite 绿色的灵敏度比UV吸收率测定法高10,000倍。
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选择性高:与紫外吸收的测量不同,这些检测不受蛋白质,游离核苷酸或非常短的寡核苷酸的影响,从而使完整的寡核苷酸和核酸的定量在复杂混合物(例如血清或全血)中更加准确。
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操作简单:这些检测方法非常简单,不需要分离步骤,因此非常适合自动化,高通量筛选。
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检测范围广:对于Helixyte 绿色的检测,定量在四个数量级内都是准确的。基于StrandBrite 的荧光检测在三个数量级上都是准确的。
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表1.dsDNA定量相关产品
货号#
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产品名称
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细胞核染料 Hoechst 33258 CAS 23491-45-4
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100 mg
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17523
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细胞核染料Hoechst 33258 CAS 23491-45-4
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1g
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17530
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细胞核染料Hoechst 33342 CAS 23491-52-3
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100 mg
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17533
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细胞核染料Hoechst 33342 CAS 23491-52-3
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1 g
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17537
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细胞核染料Hoechst 34580 CAS 911004-45-0
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5 mg
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17597
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Helixyte Green 双链DNA定量试剂
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1 ml
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17598
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Helixyte Green 双链DNA定量试剂
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10 ml
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200 tests
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17651
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Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒
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200 tests
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表2.RNA定量相关产品
货号#
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产品名称
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规格
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17610
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StrandBrite 绿色RNA定量试剂 200X DMSO溶解
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1 ml
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17611
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StrandBrite 绿色RNA定量试剂*200X DMSO溶解
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10 ml
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17655
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StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 适合于酶标仪
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1000 tests
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17656
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StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒
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100 tests
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17657
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StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 高选择性
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100 tests
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