鬼笔环肽Phalloidin染色程序及注意要点
染色程序
鬼笔环肽Phalloidin生理盐水PBS清洗细胞2次,每次10分钟;
3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分钟,生理盐水PBS清洗细胞2次;
加入5ug/ml的FITC-鬼笔环肽室温染色30-60分钟,夏季时间可以短一些,生理盐水PBS清洗细胞2次;
DAPI或hoechst33258染细胞核10分钟,生理盐水PBS清洗细胞2次;
吸去多余水分,加荧光封片液(中性或偏碱性缓冲液加等量甘油),盖上盖玻片,荧光或共聚焦显微镜下观察。
注意事项
鬼笔环肽Phalloidin的分子量小,很容易通过细胞,不需要对细胞进行冷丙酮和TRITON X-100处理。
药品价格昂贵,0.1mg的售价接近两千元,要节约使用。
毒性较大,戴上手套操作。
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