1. 百萤Cell Meter TUNEL概述
DNA片段化代表晚期细胞凋亡的特征。凋亡细胞中的DNA断裂可通过末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）检测。 TUNEL测定法依赖于DNA中存在的缺口，该缺口可通过TdT进行鉴定，TdT是一种酶，该酶催化添加标记物的dUTP的添加。现有的所有TUNEL分析均包含剧毒的椰油酸钠，这可能会诱导细胞凋亡并降低DNA的产生和DNA链。我们的Cell Meter™TUNEL细胞凋亡测定试剂盒使用了不含甲藻酸钠的专有缓冲系统。该试剂盒基于将我们独特的专有荧光染料掺入凋亡过程中形成的DNA片段中。该测定法经过优化，可在不使用抗体的情况下直接检测分离的或附着的细胞中的细胞凋亡。该试剂盒可提供所有必需成分，并具有优化的测定方案。适用于荧光酶标仪，荧光显微镜或流式细胞仪。
2. 百萤Cell Meter TUNEL参数
E x(nm) 549
E m(nm) 648
存储条件 在零下15度以下保存，避免光照
3. 百萤Cell Meter TUNEL适用仪器
流式细胞仪
E x: 488nm
E m: 660/20nm
通道: PE-Cy5通道
荧光显微镜
Ex: TRITC滤波片组
Em: TRITE滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
荧光酶标仪
Ex: 550nm
Em: 590-650nm
Cutoff: 570nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
图1.与未处理的对照相比，用 100 nM 或 1 μM 星形孢菌素 (SS) 处理 4 小时后 HeLa 细胞中 TUNEL 反应的荧光图像。细胞与 TUNEL 工作溶液在 37ºC 下孵育 1 小时。使用具有 TRITC 滤光片组的荧光显微镜分析红色荧光信号。荧光标记的 DNA 链断裂在 SS 处理的细胞中显示出强烈的荧光染色。
图2. TUNEL 染色定义的 BM 中凋亡的 PCa 细胞。PCa细胞被泛细胞角蛋白识别为绿色，TUNEL信号以红色显示。比例尺，20 微米。资料来源：Axl 是 TGF-β2 诱导的骨髓中前列腺癌细胞休眠所必需的， Yumoto 等人，《科学报告》，2016 年 11 月。