产品简介:
中文名: 细胞增殖与活性检测试剂盒
英文名: CCK-8 Cell Counting Kit-8
产品货号: TJ35001.TJ35002.TJ35003.TJ35004.TJ35000
供应商: AAT Bioquest
产品规格: TJ35001:5ml,TJ35002:10ml,TJ35003:30ml,TJ35004:100ml,TJ35000:1ml
产品参数
Ex (nm): -
Em (nm):-
分子量: -
溶剂: -
存储条件:在零下15度以下保存, 避免光照
Cell Counting Kit-8(cck-8)细胞增殖与活性检测试剂盒工作原理
Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 细胞增殖与活性检测试剂盒是百萤生物生产的一种基于 WST-8 的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。其主要成分为水溶性四唑盐 WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),WST-8 是一种类似于 MTT 的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜(formazan)。WST-8 被细胞内脱氢酶生物还原后生成的甲臜能够直接溶解在培养基中。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅;颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值,间接反映活细胞数量。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供上等的荧光探针。
|
CCK-8法
|
MTT法
|
MTS法
|
SRB法
|
XTT法
|
WST-1法
|
溶解性
|
水溶
|
难溶
|
水溶
|
水溶
|
水溶
|
水溶
|
检测波长
|
450nm
|
490nm
|
450nm
|
510nm
|
450nm
|
450nm
|
外观
|
液体
|
固体
|
液体
|
液体
|
固体
|
液体
|
是否需要重新溶解
|
不需要
|
需要
|
不需要
|
需溶于Tris碱
|
需要
|
不需要
|
便捷性
|
+++
|
++
|
+++
|
+
|
++
|
+++
|
检测效率
|
++++
|
+
|
++
|
+
|
++
|
++
|
可重复性
|
+++
|
+
|
++
|
++
|
+
|
++
|
稳定性
|
+++
|
+
|
+
|
+++
|
+
|
++
|
1.MTT法:MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。
2.MTS法:以生成有色化合物的显色反应为基础,比色分析对显色反应的基本要**:反应应具有较高的灵敏度和选择性,反应生成的有色化合物的组成恒定且较稳定,它和显色剂的颜色差别较大。选择适当的显色反应和控制好适宜的反应条件,是比色分析的关键。
3.SRB法:磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B,SRB)比色法,主要用来检测细胞增殖情况。SRB是一种粉红色阴离子染料,易溶于水,在酸性条件下可特异性地与细胞内组成蛋白质的碱性氨基酸结合;在510 nm左右波长下产生吸收峰,吸光值与细胞量成线性正相关,故可用作细胞数的定量检测。
4.XTT法:XTT是一种与MTT类似的四唑氮衍生物,可被活细胞线粒体脱氢酶还原成水溶性的棕色甲肷产物,当XTT与电子偶合剂共同使用时,甲肷的生成量与细胞的增殖程度呈正相关。
5.WST-1法:WST-1是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的甲臜(Formazan)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。WST-1是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。
|
Cell Counting Kit-8(cck-8)细胞增殖与活性检测试剂盒活力计算
活力计算:
细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)] ×100
A(加药):具有细胞、CCK8溶液和**溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培养基和CCK8溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0加药):具有细胞、CCK8溶液而没有**溶液的孔的吸光度
*细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力
CCK-8实验中的关键点(供参考):
1. 种板数;
2. 2.种板后细胞的贴壁生长时间;
3. 3.加药后的孵育时间;
4. 4.CCK-8试剂加入量;
5. 5.CCK-8试剂加入后细胞孵育时间
|