产品简介
产品中文名：Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒
产品英文名：Portelite™ Fluorimetric DNA Quantitation Kit
产品货号：17665
产品规格：100 Tests
产品概述
在进行各种分析的DNA样品制备中，DNA定量是一项非常重要的任务。 Portelite 荧光DNA定量试剂盒提供了使用Qubit荧光仪操作Helixyte Green BR快速定量dsDNA的方法。它针对Cytocite 和Qubit 荧光仪进行了优化。 Portelite 荧光DNA定量测定在三个数量级上呈线性。该测定法对RNA上的双链DNA（dsDNA）具有高度选择性，并针对测量10 pg / µL至10 ng / µL的dsDNA浓度进行了优化。Helixyte Green-BR与dsDNA结合后表现出较大的荧光增强，并且比UV吸光度读数高几个数量级。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供的Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒。
适用仪器
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量子位荧光计
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Ex:
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480 nm
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Em：
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530 nm
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规格:
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0.2 mL PCR 小瓶
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CytoCite 荧光计
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Ex:
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480 nm
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Em：
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530 nm
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规格:
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0.2 mL PCR小瓶
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实验方案
样品实验方案
简要概述
1. 准备Helixyte Green BR工作溶液
2. 在每个0.2 mL PCR管中加入190 uL 1X Helixyte Green BR工作溶液
3. 在每个试管中添加10 uL DNA标准溶液或测试样品
4. 在室温下孵育2分钟
5. 使用CytoCite 荧光仪或Qubit 检测荧光
注意：打开之前，请将所有成分置于室温下。
溶液配制
工作溶液配制
Helixyte Green-BR工作溶液：在DNA分析缓冲液（组分B）中稀释200倍Portelite dsDNA试剂（组分A）。 例如，要为8个样品准备足够的工作溶液，请将5uL Helixyte Green BR（组分A）添加到1mL DNA分析缓冲液（组分B）中。注意：通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作液免受光照。 我们建议在塑料容器中操作而不是玻璃中制备该溶液，因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为了获得好的结果，应在准备后的几个小时内使用此溶液。
实验步骤
根据DNA样品的估计浓度，样品量可以在1〜20 uL的范围内。推荐的样品量为10 uL，DNA浓度在0.2〜100 ng / uL范围内。如果使用其他样品体积，请在浓度计算中调整稀释倍数。
10 uL样品体积（DNA浓度在0.2〜100 ng / uL范围内）实验方案。
1. 在每个Cytocite 样品管（＃CCT100）或等效的0.2 mL PCR管中添加190 uL 1X Helixyte Green BR工作溶液。注意：请使用薄壁聚丙烯透明0.2 mL PCR管，例如＃CCT100。
2. 向每个试管中加入10 µL DNA标准品或测试样品，然后离心2〜3秒进行混合。
3. 将所有试管在室温下孵育2分钟。
4. 将样品插入CytoCite 或Quibit 中，并通过绿色荧光通道检测荧光。若使用CytoCite，请遵循适用于CytoCite 荧光仪的程序。
标准校准曲线的准备
对于Portelite 分析，您可以选择使用DNA标准液绘制校正曲线。
1. 在DNA分析缓冲液（成分B）中，用100 ng/uL的DNA标准BR#2（成分D）进行1/3系列稀释，得到30、10、3、1、0.3、0.1和0 ng/uL的DNA标准稀释液。
2. 在每个试管中加入190 uL Helixyte Green BR工作溶液。
3. 将10 uL标准液或10 uL样品添加到0.2 mL PCR管中。
4. 将反应在室温下孵育2分钟。
5. 将样品插入CytoCite ，并通过绿色荧光通道检测荧光。
图示
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图1.使用具有宽动态范围的Portelite 荧光DNA定量试剂盒生成的DNA标准曲线。 使用绿色荧光通道定量荧光强度，使用线性拟合计算回归模型。
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