公司简介
西安百萤生物科技有限公司是一家专注从事生物、化学试剂及其试剂盒的高新技术企业;主要以荧光探针,分子探针,核酸/蛋白质标记、细胞检测等技术和产品为研发核心,产品应用于基因合成、细胞检测、活体示踪,抗体标记、新药筛选等领域。
Cell Meter PE-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞凋亡的试剂盒,膜联蛋白V可以与包括PE的荧光染料结合。该染料保留了其对磷脂酰丝氨酸(PS)的高亲和力,因此可用作流式细胞术分析正在经历细胞凋亡的细胞的敏感探针。由于PS的外化发生在细胞凋亡的早期阶段,PE膜联蛋白V染色可以比基于核变化(例如DNA片段化)的测定更早地鉴定细胞凋亡。 PE膜联蛋白V染色先于膜完整性的丧失,膜完整性伴随由凋亡或坏死过程导致的新细胞死亡阶段。因此,用PE膜联蛋白V染色通常与碘化丙啶(PI)或7-AAD等活体染料结合使用,使研究者能够鉴别早期凋亡细胞(7-AAD阴性,PE膜联蛋白V阳性)。
数据分析
在活的非凋亡细胞中,RPE-膜联蛋白V检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡,其通常为所有细胞的2-6%。 在凋亡细胞中,RPE-膜联蛋白V与磷脂酰丝氨酸结合,磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外叶上,因此导致染色强度增加。
图1.使用Cell Meter RPE-膜联蛋白V结合细胞凋亡检测试剂盒检测RPE-膜联蛋白V对Jurkat细胞中磷脂酰丝氨酸的结合活性。 将Jurkat细胞在37℃,5%CO2培养箱中在没有(蓝色)或1μM星形孢菌素(红色)的情况下处理4-5小时,然后用RPE-膜联蛋白V染色30分钟。 使用FACSCalibur(Becton Dickinson)流式细胞仪使用FL2通道测量RPE-膜联蛋白V的荧光强度。
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参考文献
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Detection of apoptosis based on the interaction between annexin V and phosphatidylserine
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Journal: Anal Chem (2009): 2410
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Eurycomanone induce apoptosis in HepG2 cells via up-regulation of p53
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Evaluation of cell surface expression of phosphatidylserine in ovarian carcinoma effusions using the annexin-V/7-AAD assay: clinical relevance and comparison with other apoptosis parameters
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Glycogen synthase kinase-3 and Omi/HtrA2 induce annexin A2 cleavage followed by cell cycle inhibition and apoptosis
Authors: Wang CY, Lin YS, Su WC, Chen CL, Lin CF.
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