与Fluo-4等单波长探针不同，对于Ca²⁺，Fura探针的吸收（或荧光激发）从380 nm（Fura-2），415 nm（Fura-8和Fura-10）转变，与Ca²⁺结合的无螯合剂可达到约340 nm（Fura-2），355 nm（Fura-8和Fura-10），荧光发射的波长相对独立于Ca²⁺浓度。通过使用在340nm和380nm（对于Fura-2），355nm和415nm（对于Fura-8和Fura-10）进行激发并分配荧光强度来获得Ca²⁺依赖性荧光信号的动态范围在〜510 nm（Fura-2），525 nm（Fura-8和Fura-10）处检测到。根据该比率，可以使用从校准曲线得出的解离常数（Kd）估算细胞内Ca²⁺的水平。通过使用在两个波长下激发产生的荧光强度之比，诸如染料分布不均匀和光致漂白等因素将被小化，因为它们应在相同程度上影响两种测量。校准溶液开始应不含重金属离子，例如锰，这可能会影响其荧光和对钙的亲和力。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供的Fura-10，钾盐。 

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