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武汉华联科生物技术有限公司
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**组化石蜡切片**组化操作步骤
**组化
石蜡切片**组化操作步骤详细解析
**组化
三步法
石蜡切片脱蜡至水。
3%H 2 O 2 室温孵育 10-15 分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。
蒸馏水冲洗, PBS 浸泡 5 分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。
5~10 %正常山羊血清封闭,室温孵育 10 分钟。倾去血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液, 37 ℃孵育 1~2 小时或 4 ℃过夜。
PBS 冲洗, 5 分钟× 3 次。
滴加适当量生物素标记二抗工作液, 37 ℃或室温孵育 10~30 分钟。
PBS 冲洗, 5 分钟× 3 次。
滴加适当量辣根酶标记链霉卵白素工作液, 37 ℃或室温孵育 10~30 分钟。
PBS 冲洗, 5 分钟× 3 次。
显色剂显色( DAB 或 AEC )。
自来水充分冲洗,复染,脱水透明(如需要)、封片。
**组化
两步法
石蜡切片脱蜡至水。
PBS 浸泡 2 分钟× 3 次,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。
3%H 2 O 2 室温孵育 10~15 分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。蒸馏水冲洗, PBS 浸泡 2 分钟× 3 次,
滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液, 37 ℃孵育 1~2 小时或 4 ℃过夜。
PBS 冲洗, 2 分钟× 3 次。
滴加适当量的试剂 1 (聚合物辅助剂), 37 ℃或室温孵育 10-30分钟。
PBS 冲洗, 2 分钟× 3 次。
滴加适当量的试剂 2 (辣根酶标记山羊抗兔 / 小鼠 IgG 多聚体), 37 ℃或室温孵育 10-30分钟。
PBS 冲洗, 2 分钟× 3 次。
显色剂显色( DAB 或 AEC )。
自来水充分冲洗,复染,脱水透明(如需要)、封片。
注:
抗原修复方法:
微波修复:将切片放入修复液中,然后将修复液烧开,此时降低火力持续 15-20分钟。然后自然冷却。
高压修复:将修复液烧开后将切片放入高压锅中,然后盖好锅盖,加上气压阀,继续加热 。 待喷汽后开始计时 2.0-2.5分钟后停止加热,自然冷却。
酶消化:滴加适当量胃酶或胰酶工作液室温孵育 15-20分钟
除了以上产品外,公司同时还供应有
**印迹Western Blot
、
酶联**ELISA
、
实时荧光定量PCR
等产品,我们公司具备有*实战的技术,专业的运营团队,为您创造以用户体验为前提的服务,服务的至善至美是我们永无止境的追求。因为以民为本,所以值得信赖;因为专业专职,所以值得选择.以上信息仅供参考,详情请致电相关工作人员为您解答。
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