影响胎牛血清质量的几大因素!

市场上的胎牛血清种类繁多，鱼龙混杂，很多科研工作者，特别是刚接触细胞培养的人，难以分辨血清质量的优劣。本人根据十多年来血清生产销售的经验，总结如下：

一、外观

拿到血清，*先接触的是血清外观，对于缺少细胞培养经验的人来说，外观的判断尤为重要

1、颜色

根据血红蛋白含量的不同，胎牛血清可表现出黄色或红色，我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl，实际上，血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响，这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度，良好的操作能降低血清的溶血。

国产血清的采血点很分散，大多是由屠户采血后马上离心收集，所以很少会有溶血，表现出明亮的蜡黄色，当然，国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。

进口胎牛血清或多或少总有点溶血，因为真正的胎牛血清凝血功能差，红细胞容易破裂。

总的来说，国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清，质量*好的呈现出谈黄、微红色，如Gibco 16000，差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然，热灭**清或保存不当的血清，由于血红蛋白的破坏氧化，会呈现出暗红，甚至咖啡色。

2、沉淀

很多血清客户，会发现进口血清有沉淀，从而怀疑血清的质量问题，这是没有根据的。

血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生，对血清质量没有任何影响，沉淀的产生原因很多，和厂家的加工生产方式密切相关。

国产的血清，大多来自北方，由于价格低廉，保存环境都不好，从采血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融，每次冻融过程，就会析出部分纤维蛋白沉淀，这样，血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”，很少有沉淀产生。

进口的胎牛血清，过滤分装前很少会反复冻融，生产后的成品也是清澈的，但随着时间的推移，血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。当然，进口的新生牛血清，一般牛龄都在2周左右，血清中的各种蛋白含量明显偏高，生产后血清可能会浑浊，甚至有大量沉淀。

当然，购买回来的血清都是冰冻状态，使用时需要融化，融化过程*好在温度较低的状态下慢慢进行，否则沉淀相对较多，虽然沉淀并不直接影响血清的质量，但对细胞的显微观察有一定的阻碍。

3、澄清度

进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低，表现为稀薄、清淡，而国产血清，因为绝大多数是新生牛血清，相对而言更加粘稠，颜色略深，这对于初步接触血清的人很难判断，但把两者进行对比，可容易分辨。

二、主要技术指标

目前国内血清的质量标准是2005版的《中华人民共和国药典》，主要指标有以下几点：

1、内**

标准为不高于5EU/ml。内**是**破碎后细胞壁的成分，因此内**含量的高低可表现出采血到生产一系列过程中的无菌操作情况。目前，国产血清基本都能达到这一要求，很多进口胎牛血清内**含量反而更高，如Gibco 26140，只要求不高于50EU/ml，高出我国标准10倍，即使是16000，也要10EU/ml，血清质量也未见影响。可见，内**含量偏高不影响质量，除非含量极高，预示着已经污染。

2、总蛋白含量

胎牛血清一般范围是30-40mg/ml，数值偏高，说明采血的牛龄偏大，不是胎牛，数值偏低，表明血清可能掺水了。

3、血红蛋白

标准为不高于20mg/dl，颜色越红，数值越高，反之，数值越低。

4、pH

国产血清，大多高于7.5，进口胎牛血清，大多低于7.5，具体原因未知，可能和牛龄有关，这也能用来初步鉴别血清的来源。

5、微生物

包括**、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等。随着国内血清厂家生产条件的改善提高，**、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制，支原体经过0.1um过滤，大多也能**。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的，主要是生产环境过程中带入，又无法过滤，很难彻底**，但对血清质量影响不大。病原性病毒，特别是BVDV，在国产血清中几乎90%以上都存在，这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一，而进口胎牛血清中基本都控制的很好。

6、免疫球蛋白

国产血清的只是定性检测，结果也很不准确，进口胎牛血清大多定量检测。免��球蛋白的数值能完全体现出采血的时的牛龄情况，国产血清，基本都是新生牛的，血清中容易产生IgM，IgG的含量也偏高，进口胎牛血清，不含IgM，IgG的含量也较低。

7、其它

不管是国产还是进口血清，都是不测***的（无四环素胎牛血**外）。国外，***的使用很严格，用量也很少，每头奶牛的产品包括血清都可以溯源的，因此可以做到胎牛血清中不含***或含量极低；国内，***的滥用已成了普遍现象，血清中残留很高，对细胞培养极为不利，这是国产血清质量差的根本原因。