上海复申生物科技有限公司
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PeproTech重组细胞因子常见问题解答

发布时间:2014-06-04
PeproTech公司的重组细胞因子产品经过了十分严格的生产、纯化及质检过程,保证其在投放市场之前,达到如下要求:
1. 真实性重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。
2. 纯度应用SDS-PAGERP-HPLC方法分析产品纯度。
3. 生物活性进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo)活性检测。
4. 蛋白含量通过紫外光谱分析,SDS-PAGE电泳检测;必要时应用HPLC定量标准蛋白溶液。
5. 内**kinetic LAL法检测内**。
6. 微生物重组蛋白在装瓶之前都经过滤**处理。
产品随附的说明书上载有产品的各项相关信息。请仔细阅读这些信息,了解其配制和贮存提示。如果在阅读说明书后仍需更多信息,请查看以下常见问题解答或致电我们的技术服务部门
 
重组细胞因子的冻干状态
    与市场上已有的其他蛋白产品不同PeproTech细胞因子不含carrier protein或其他添加物(如BSAHAS、蔗糖等)而是以低盐的形式做冻干处理因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内
形成很薄或不可见的蛋白层PeproTech的质控过程确保每管装有非常准确量的蛋白产品所以我们建议在收到试剂后务必于开盖前先离心20-30秒,使可能附于管盖或管壁的蛋白成分聚集于管低(此时能否见到白色沉淀均属正常现象)。
重组细胞因子活性单位(units)的换算
        各公司在开发出重组细胞因子并检测其活性后,通常会以ED50(半数有效浓度)或units(活性单位)来标识其细胞因子的生物活性。因此1mg细胞因子中所含的活性单位(units)可以理解为将1mg/ml细胞因子原液稀释成ED50的稀释倍数,
以下是二者的换算公式:
                   1x106
                _______________     = specific activity (units/mg)
                                      ED50(ng/ml)
重组细胞因子的稳定性
      除非产品说明书上另有特别说明,否则所有PeproTech蛋白产品都为冻干粉形式,在室温下也能保持很好的稳定性。但是,我们推荐冻干产品*好保存于-20℃。大多数冻干产品经溶解和稀释后,可短时间保存于4℃;若要进行较长时间保存,
我们建议稀释到工作液浓度并加入一定的carrier protein(如0.1% BSA),然后分装保存于-20℃。请注意每一次冻融过程都会造成蛋白的部分变性,应避免反复冻融。 
重组细胞因子的交叉活性
      除了少数例外,大多数人类细胞因子对小鼠细胞都有活性许多小鼠细胞因子对人类细胞也有活力表现但是与相应的人类细胞因子相比比活力较低一些人类的细胞因子如IL-7在小鼠细胞中甚至表现出比相应的小鼠细胞因子更高的比活力
而干扰素GM-CSFIL-3 IL-4 是物种特异性的对于非人类细胞几乎没有活性相反,成纤维细胞生长因子 (FGFs) 和神经营养因子 (neurotrophins) 是高度保守的在其它的动物物种细胞中也能表现很好的活性

 

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