Hygromycin B 潮霉素B
规格信息：
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产品编号
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产品名称
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规格
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价格（元）
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FS0012-1G
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Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）
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1g
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600.00
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FS0012-5G
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Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）
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5g
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2400.00
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FS0012-10G
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Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）
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10g
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3840.00
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FS0012-10ML
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Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B（50 mg/ml）
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10ml
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680.00
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FS0012-20ML
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Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B（50 mg/ml）
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20ml
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1050.00
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性状/储存
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-20℃保存（干粉），4℃保存（液体）
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Hygromycin B 潮霉素B生物应用：
1） 筛选和维持培养稳定转染Hph+载体的原核细胞或真核细胞（植物细胞和哺乳动物细胞）；
2） 由于作用模式的差异，常与G418 (GeneticinTM)，Zeocin™ 和blasticidin S联合使用，筛选稳定转染两个不同载体的细胞株；
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双抗性稳定转染细胞筛选的***作用机制及抗性
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***
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抗性机制
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抗性基因
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哺乳动物筛选浓度
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潮霉素B
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干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读
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Hph
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200~500μg/mL
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G418
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干扰80S核糖体功能和抑制蛋白合成
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Tn5/Tn601
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100~1000μg/mL
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Zeocin
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掺入或者切割DNA引起细胞死亡
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Sh ble
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50~100μg/mL
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blasticidin S
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核糖体上抑制肽键形成
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Bsd/BSD
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3~50μg/mL
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3）抗病毒剂，由于潮霉素B选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞，而且具有抑制翻译的功效；
4）作为驱虫药加入动物饲料；
Hygromycin B 潮霉素B应用浓度：
潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化。推荐使用浓度为50-1000 μg/mL，*佳浓度需要杀灭曲线来确定。
哺乳动物细胞·200-500 μg/mL；**/植物细胞·100-300 μg/mL；**·300-1000μg/mL；
Hygromycin B 潮霉素B产品使用：
使用一：杀灭曲线确定*佳杀死浓度（仅作参考，因个人检测体系而异）
（1）往组织培养级的96孔板内加入未转染细胞，细胞密度约50-200细胞/孔；细胞贴壁之后，往每孔加入含不同浓度（如50-1000μg/mL，至少5个浓度）潮霉素B的200μL新鲜培养基；
（2）37℃，5% CO2培养箱孵育细胞10-14天；
（3）培养5-7天后更换新的培养液，培养液内含有相应浓度的潮霉素B；
（4）10-14天后使用细胞增殖方法如MTT，CCK-8等评估细胞活力；也可以通过检测细胞克隆数或百分比汇合率来确定毒性效应。一般选择在10-14天能够杀死所有细胞的*小浓度为*佳筛选浓度。
使用二：筛选稳定转染细胞
（1）对于贴壁细胞，直接吸去60mm培养皿内的转染细胞培养基，然后加入含有潮霉素B的新鲜培养基5-6ml；对于悬浮细胞，无菌条件250x g,离心10min除去旧的转染细胞培养基，然后悬浮在约5ml的含潮霉素B的新鲜培养基；
（2） 5-7天后，如上方法更换含有潮霉素B的新鲜培养基；
（3） 再孵育细胞5-7天；
（4） 10-14天孵育后，培养体系中只含有能够表达潮霉素B抗性表型的活细胞。因此筛选之后如步骤一，更换不含潮霉素B的新鲜培养基。
基本属性
CAS号：31282-04-9
英文名称：Hygromycin B
分子式：C20H37N3O13
分子量：527.53
理化性质：
溶解性：水溶性
样品状态：溶液，50 mg/ml，缓冲液为PBS（phosphate-buffered saline），经过0.2 μm孔径滤膜过滤。
纯度：>98% (HPLC)
LD50：小鼠（i.v.）6 mg
；天竺鼠(i.p.) 13 mg； 大鼠 (i.p.) 63 mg
工作浓度：细胞培养中为50 - 1,000 μg/ml。哺乳动物细胞培养通常使用的浓度为200 μg/ml。但是，*适浓度必须通过实验确定，这需要根据细胞类型不同而改变
