山东金普分析仪器有限公司，采用**胺衍生气相色谱法,通过多次摸索,试验证明,分析效果好,尤其适用于样品的快速检测。
**胺是肉类及水产品中常见的挥发胺,它们可以转变成具有致癌作用的N-亚硝基氨基化合物,**胺标准检测法为分光光度法,较繁琐,我们采用**胺衍生气相色谱法,通过多次摸索,试验证明,分析效果好,尤其适用于样品的快速检测。
1材料与方法
1.1仪器与试剂
山东金普分析仪器有限公司GC-2010气相色谱仪,氢火焰离子化检测器,浙大N2000色谱工作站,微量注射器,顶空瓶,离心机,恒温水浴锅。盐酸**胺,三***,氢氧化钾均为分析纯。
1.2样品预处理
1.2.1将猪肉可食用部位混合切碎,每份20g,加入10%三***40ml置匀浆机中,匀化1min,再分离5min,过滤,向残渣中再加入10%三***40ml,同上操作,再过滤,合并滤液,用5mol/L氢氧化钾调PH至4～5,用去离子水定容至100ml,制备成样品试样[2]。
1.2.2将盛有2ml50%氢氧化钾的顶空瓶密闭后,置水浴中加热至60℃,从橡胶瓶塞注入1ml样品试样,60℃水浴中恒温5min,抽取顶空气体1ml,进行测试。
1.3色谱条件
色谱柱:3mm×2m玻璃柱,内装chromosorb10380-100目。温度:柱温110℃;汽化室280℃;检测器250℃。氮气:30ml/min;氢气:30ml/min;空气:300ml/min。
2、结果与讨论
2．1色谱条件的选择
实验对柱温、汽化室、检测器温度进行筛选,结果表明分别为110℃、280℃、250℃分离效果好,灵敏度高。
2．2水浴时间的选择
随着水浴时间的增长,挥发出的**胺越多,4～10min趋于稳定,10min后逐渐下降,为使**胺能充分挥发出来,又节省时间,故选用5min为*佳水浴时间。
2．3水浴温度的选择
实验证明,随着水浴温度的升高,挥发出来的**胺越多,温度过高,超过70℃,响应值不稳定,温度过低,挥发出来的**胺不完全,为得到*大灵敏度,并保证响应值的稳定性,故选择60℃为水浴*佳条件。
2．4标准曲线绘制
用0.1mol/L盐酸配制**胺标准溶液,浓度分别为5,10,15,20,25μg/ml,每个浓度取1ml按样品测定操作,用峰面积对**胺含量(μg)作图,其回归方程为Y=-51.85+3.129×102X,r=0.9998,RSD=2.4%。
2．5方法回收率与精密度
称取20g待测样品,分别加入0.5、1.0、2.0mg的**胺的标准使用液,以下按样品处理步骤操作,各测3次,测定的加标回收率为91.8%～98.2%,相对标准偏差在2.2%。
2.6方法检出限
按取样20g,浸提后定容至100ml,本方法*低能检出猪肉中**胺的含量为0.095mg/100g,目前猪肉中该项指标尚无卫生标准,参考已有的火腿卫生限值,我们认为这一检出浓度能满足猪肉的卫生监测要求。
3结论
用本法检测猪肉中**胺,实践证明,该方法准确、可靠、灵敏度高,测定简便、快速、费用小,能满足日常卫生生监测。