分光光度计操作规程
一、仪器设备
721、723可见分光光度计、752紫外可见分光光度计、比色液及标准溶液、滤纸等。
二、原 理
光谱仪器是一种简单易用的分光光度法测定通用仪器，不同型号的机器测定的波长范围不同，可以根据自己的需要选择要使用的仪器。
不同型号的光谱仪器的构造有很大的差别，但是其基本原理是相同的。根据溶液中各种成分对透过光的吸光度不同，在一定范围内，吸光值（或者透过率）与溶质的浓度成正比（玻尔定律）。通过准确浓度的标准品对应其吸光值（透过率）作图，我们就可以得到一条标准曲线。测定未知浓度的待测样品的吸光值（透过率），与标准曲线相比较就可以得到其浓度。
四、适用范围
可广泛用于医学卫生、临床检测、生物化学、石油化工、环保检测、质量控制等方面作定量、定性分析。
具体到我们实验室，可以对多糖、蛋白、核酸等物质进行定性、定量测量。同时UV－3150PC紫外可见近红外分光光度计还可以测量近红外区的固体、液体样品的吸收光谱，RF-5301PC荧光分光光度计可以测定荧光物质的发光强度光谱，同时他们自带的软件可以方便的进行数据处理与分析。
五、 分光光度计操作规程
我们以UV－3150PC紫外可见近红外分光光度计为例讲述光谱仪器的性能和操作方法。
1、插上电源，打开光度计前面的电源开关。
2、双击计算机桌面UVProbe图标，打开UVProbe软件，点击UVProbe中“Connect”图标联机，出现自检画面。
3、如自检完全部绿灯亮，则点击“OK”进入系统。若出现红灯亮，可关掉光度计重新连接，若仍未通过自检，应立即报告仪器负责老师。
4、完全通过并进入系统，出现UVProbe菜单栏和工具栏。UVProbe有四大主要模块，包括光谱扫描模块、光度测量模块、时间扫描模块和报告生成器。每种模式都可以直接点击后面的方法设定按钮设置方法。
5、点下光谱扫描图标，出现光谱扫描界面。
6、点击方法按钮，出现方法设置对话框。在此可以设置扫描波长范围，仪器的*大范围为3200～190nm。可以设置扫描速度，一般可选中速（Medium）或快速（Fast）进行扫描。采样间隔表示光度计每隔多少nm读一个吸光度值，如没有特殊要求，选择自动即可。可选择是否重复扫描曲线，若重复则设置重复次数和间隔时间。
7、点击“Sample Preparation”输入样品信息。包括样品的质量、体积、稀释倍数和测量光程等。也可以输入样品的其他信息。
8、点击“Instrument Parameters（仪器参数）”设置测量方式和仪器的一些参数。在测量模式中可选择“Transmittance（透过率）”、“Absorbance（吸光度）”、“Energy（能量）”和“Reflectance（反射）”，其中Reflectance一般用积分球测定固体样品时使用。狭缝设置在3200～800nm下设为5nm，在800～190nm设为2nm。若包括这两个范围的波长如1500～500nm则选择狭缝为5nm。
9、换灯和检测器可根据所测样品进行设置，换灯在393～282nm范围内任意值均可，换检测器在895～750nm范围内任设一个值即可。但换灯和检测器由于仪器进行机械的移动，会造成信号波动较大，称仪器噪音大，此时所得扫描曲线误差较大，所以所设波长应该避免在样品吸收峰位置以免影响测定值。
10、所有参数设置完成后，两个样品架均不放置样品或两个均放上同样的空白溶液，点击“Baseline”，开始进行基线校正，仪器扫描完成后，点击“λGoToWL”将波长转到750nm，点击“Auto Zero”把750nm的波长设为0。点击“Start”再次扫描，若得出曲线*值均小于0.001，则认为基线平坦，若数值较大，则将750nm吸光度设为0重新进行基线扫描。
11、基线校正完成后，取出样品架的空白溶液，放入样品溶液，点击“Start”开始扫描曲线。扫描完成后，出现保存路径框和文件名框，设置好后出现扫描曲线。
12、曲线扫描完成后，在谱图上点击鼠标右键，出现快捷菜单。点击“AutoScale”可是软件自动调节图像坐标使之适合扫描所得数据。点击“Cross Hair>Display”鼠标显示为交叉线，用鼠标将交叉线放到曲线上某点即可显示该点的波长和吸光度值。
13、点击“Label”可以在谱图上添加标签，可在其中输入文本以标记谱图。点击“Legend”出现各数据保存图，若在前面框里勾选该光谱数据，则在左面重叠图上显示其曲线。
14、若从右键快捷菜单中选择“Customize（自定义）”，可以自定义曲线显示颜色还可定义坐标轴的数值。
15、得出曲线后可以对谱图进行一系列的处理。
（1）点击“DataPrint（显示数据）”图标可以将谱图曲线直接显示为数值。
（2）点击“Manipulate（运算）”图标，可以进行加减乘除、差谱、扣除空白、倒数光谱、对数光谱等处理。
（3）点击“PeakPoint（显示峰值）”按钮显示“波峰”和“波谷”的数值。
（4）点击“PointPick”图标，输入要显示的波长值，立即显示出所输入波长处的吸光度值。
（5）点击“PeakArea”，设定峰阈值，即显示大于此阈值的峰区域。
（6）点击“Sewingbox（裁缝）”图标，可以进行谱图的裁剪和缝合。
16、光谱曲线扫描完成后数据实际直接保存在内存中，并没有保存到硬盘上，此时若关闭窗口，电脑会提示“Some Spectrum data has not been saved!Do you still want to exit and lostunsaved change？（还有光谱数据尚未保存，你是要离开而不保存数据吗？）”选择“No”返回主界面保存所有数据。
六、注意事项
1、光度计灯源寿命有限，若长时间不测量，应通过UVProbe软件断开连接（点击“Disconnect”），然后关闭光度计电源。
2、使用分光光度计时要保证样品室**干净，小心放入样品，放入比色皿前一定要先用滤纸和擦镜纸将比色皿外表面擦干净，不要污染样品池和光度计外表面。
3、仪器自检和扫描的过程中，不要打开样品室盖。
4、软件不会自动保存数据，所有的数据要保存都必须点击“Save”或者“SaveAs”进行另存。否则数据会丢失。
5、认真填写贵重仪器使用记录。
以上是分光光度计操作规程，此外，我公司主营数显恒温振荡器，大型摇床，石英亚沸高纯水蒸馏器，台式电动离心机，可调高速匀浆机，磁力搅拌器，氮吹仪，采样器等多种仪器。如果您对我们的产品感兴趣的话，欢迎联系我们。
一、测量前的准备工作
1、开机
确认样品室中无挡光物，打开打印机电源，打开主机电源，然后打开计算机电源计算机自动启动window95/98，在【开始】菜单下选择【程序】-【TU-1900UVWin4.0】-【TU-1900UVWin】即可启动TU-1900控制程序，进入光度计自检过程，自检无误后进入主工作程序。仪器必须经过15~30分钟的预热稳定时间，然后再开始测量。
2、设置通讯端口
选择菜单[配置]-[通讯端口]，在此窗口中可选择软件所使用的通讯端口“COM1”或者“COM2”等，单击[确定]。
3、基线校正
保证仪器在整个波段范围内基线的平直度及光度准确度，每次测量前需进行基线校正或自动校零。
4、暗点流校正
当样品侧插入黑挡块时，透过率应为0，如有误差需进行暗电流校正。选择扫描参数的波长范围为所用波长（通常可取900-190nm），插入黑挡块后进行暗电流校正并存储数据。
二、基本操作
仪器有四个工作模式分别为：
光谱测量——测量样品的光谱曲线，对应【应用】菜单的【光谱测量】项。
光度测量——测量样品相应波长的光度值，对应【应用】菜单的【光度测量】项。
定量测量——测量并计算样品的浓度，对应【应用】菜单的【定量测量】项。
时间扫描——记录样品相应波长吸光度或透过率的时间变化曲线，对应【应用】菜单的【时间扫描】项。
1、光度测量
可测量样品的单波长或多至10个波长的吸光度值或透过率值。单击菜单【应用】-【光度测量】可打开光度测量窗口进行修改参数。
<1>设定参数
测量前需要设定测量操作的参数和条件。按【F6】或选择【配置】菜单【参数】项，弹出光度测量参数设置对话框。
<2>测量
测量时，系统将按照设定好的波长条件逐个地移到相应波长位置，并将测定结果显示在表格的*后一行和保存在内存中，同时系统调出表达式进行运算，将运算结果显示在<Result>栏内和存入内存中。
2、光谱扫描
可记录样品的光度值随波长的变化曲线即光谱曲线。具有光谱扫描、数据处理、谱图显示、条件设定等操作。系统在计算机内存中存了10个记录通道，可以同时存10条谱线进行数据处理和显示。单击菜单【应用】-【光谱测量】可打开光谱扫描窗口。
<1>设定参数
测量前需要设定测量操作的参数和条件。按【F6】或选择【配置】菜单【参数】项，弹出光谱测量参数设置对话框进行修改参数。
10个通道的图谱颜色可由颜色设置对话框设置。选择【配置】-【颜色】弹出颜色设置对话框图。
选择菜单【配置】-【目录】弹出目录设置对话框。
<2>基线校正
测量样品钱应对空白样品进行基线校正以消除比色皿误差。单击命令条得“Base line”按钮，可进行基线校正，基线校正的波长范围为扫描参数设定的波长范围，校正数据保存在当前内存中。
<3>扫描
按照设定的波长范围、测定方式和采样间隔进行光谱扫描测量。插入样品后，单击命令条“Start”按钮开始光谱扫描。如需中途停止，按“Stop”按钮可停止当前操作。选择重复扫描时，可以连续循环扫描多至999次。
<4>数据处理
数学计算：选择菜单【数据处理】-【数**算】弹出数学计算对话框。
图谱转换：选择菜单【数据处理】-【变换】弹出光谱变换对话框。
峰值检出：选择菜单【数据处理】-【峰值检出】弹出峰值检出对话框。并将当前通道的峰、谷值显示出来。
<5>谱图显示
对谱图工作区的谱图数据进行各种类型的显示操作。可由【视图】菜单或右击键弹出快捷菜单操作。
3、定量测定
可进行单波长定量、双波长定量、三波长定量、微分定量、数据处理等操作。分定量测定窗口（未知样品测定），定量测定-标样测定窗口（标准样品测定）。单击菜单【应用】-【定量测量】可打开定量测量窗口。
<1>设定参数
测量前需要设定测量操作的参数和条件。按【F6】或选择【配置】菜单【参数选择】项，弹出对话框进行修改参数。
<2>标样测定
单击命令条“Start”按钮可打开定量测定-标样测定窗口，单击命令条“Read”按钮弹出对话框。插入待测的标样输入编号，单击确认钮几颗测量并显示该标样的测量值。
<3>曲线显示
对于K系数法，显示标准曲线公示及系数。对于多点工作曲线法，首先进行拟合运算，然后显示标准曲线及其他数据。选择菜单【数据处理】-【工作曲线】弹出对话框。
<4>测量
在定量测定窗**动时按【F8】或者单击命令条“Read”钮，系统将按照设定好的定量测定模式逐个地移动到相应波长位置测试并根据标准工作曲线计算出浓度，显示在屏幕上。
4、时间扫描
可进行单波长时间扫描、数据处理、谱图显示、条件设定等操作。系统在内存开了10个记录通道。单击菜单【应用】-【时间扫描】可打开时间扫描窗口。
<1>设定参数
测量前需要设定测量操作的参数和条件。按【F6】或选择【配置】菜单【参数】项，弹出时间扫描参数设置对话框进行参数修改。
<2>时间扫描
按照设定的波长位置，扫描时间，光度方式和时间间隔进行时间扫描测量，结果同时显示在屏幕上。在样品及参比侧放入空白样品，单击命令条“Auto zero”按钮进行吸光度零校正。出入样品后，单击命令条“Read”按钮开始时间扫描。如需中途停止在时间扫描子窗口的图谱显示的���侧按鼠标右键，可停止当前操作。
<3>图谱显示
提供图谱的放大缩小数据读取等功能，其操作痛光谱扫描。
分光光度计操作规程
三、关机
测量工作结束后，用户应选择【文件】菜单的【退出】项退出系统，以便保存必要的操作数据。关电源时，应先关闭仪器主机的电源，然后正确退出Windows并关闭计算机电源，*后关闭其它设备的电源。
分光光度计操作规程参考资料：杭州聚同电子有限公司