SNP检测技术服务|实验技术服务

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SNP检测技术服务|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧，承诺客户不成功不收费。在获得重组蛋白产品的同时，我们也会提供相应的原始数据和原始图片,不需要再额外花费精力重复实验。另一方面，我们所有的实验数据真实可信，我们提供原始的表达菌株和克隆质粒，客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。
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测序实验流程：
该系统采用ABI 3730xl DNA测序仪，分型准确率≧99.9%，分型成功率≧95%。和PCR重测序一样，SNaPshot分型也是SNP检测的金标准。适合5-12个及以上的SNP位点的检测。该检测方法的主要原理为单碱基延伸技术。即在紧邻SNP位点的地方设计引物，反应时加入SNP位点引物，扩增出的带有SNP位点的PCR产物，带荧光标记的ddNTP，通过单碱基延伸后引物带上SNP位点碱基相关的荧光，随后将反应产物在ABI 3730xl核酸检测仪上分析后，就能得到SNP位点的信息。该方法一个反应就能检测5-12个SNP位点，在充分利用测序法准确直观的优点的同时，增加了一次反应检测的位点数，极大地降低了实验成本。
*检测结果准确率在99.9%以上，和测序法一样是SNP检测的金标准。
*一次检测5-12个位点，96个样品，适合中到大型SNP分型项目。
*应用灵活。可以根据需要灵活定制实验方案，检测基因组中任意位置的SNP位点，甚至可以将不同物种的*基因组放在一起进行检测。
*检测费用相对较低。
CR-测序法：
*经典的方法，通过PCR扩增包含SNP位点的片段，测序获得SNP位点信息，适于调查未知SNP位点和连续分布（1kb以内）的SNP位点信息。
PCR-限制性酶切；
如果某个SNP位点恰好是限制性酶切位点，则通过PCR酶切再结合电泳分析不失为一种简单经济的区分方法，适于单个的SNP位点分析。
连接酶检测反应(LDR)分型方法：
连接酶只能连接与模板完全互补的两个片段，利用连接酶这一特性，通过对需检测SNP位点上下游设计特异性标记探针,在连接酶的作用下,当特异性的寡核苷酸探针与互补靶序列DNA完全配对时连接反应得以顺利进行,若寡核苷酸探针与其不完全配对,则连接反应不能进行。*后通过测序仪检测标记的寡核苷酸探针，得到分型结果，是一种简单高效的分型方法，适于样本量和位点数目都不大的SNP分析。
HRM:
用荧光定量PCR中的染料法做出的高分辨率溶解曲线，区分只有单一碱基不同的PCR扩增片段，只能在温控均一度在±0.1℃的仪器中使用。成本低，适合少数位点多样品的SNP扫描。
Taqman 探针法
应用ABI7900、ABI 7500型实时荧光定量PCR仪，采用ABI合成探针或国产探针，完成SNP的检测分析，适用于位点少，样本通量高的检测。
焦磷酸测序（ Pyrosequencing ）
应用Qiagen公司PyroMark Q96 ID平台，可定量等位基因，即使是低频率等位基因；同时可检测未知突变；不同的应用实验可同时在一次运行中实现；
质谱法
Sequnom质谱法将稳健的单碱基引物延伸反应与灵敏可靠的MALDI-TOF质谱检测的优点相结合，提供了高灵敏性低成本的SNP检测服务。该检测服务采用专业的引物设计和基因分型软件，可对95%以上已被证实的SNP进行实验设计。一张芯片可平行完成384个样本的实验，单个well*高可达40重反应。
试验设计，包括扩增区选择和引物设计
试验条件优化以及验证
高通量PCR扩增，产物纯化以及双向DNA测序
测序结果分析（软件和人工），SNP位点的发现.