抗体定制技术服务|实验技术服务

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抗体定制技术服务|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧，承诺客户不成功不收费。我们所有的实验数据真实可信，我们提供原始的表达菌株和克隆质粒，客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。
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测序实验流程：
抗体检测服务
ELISA（酶联免疫吸附实验）
Dot Blot（斑点印迹实验）
Western Blot（免疫印迹实验）
IHC （免疫组织化学实验）
抗体标记服务
HRP（辣根过氧化物酶）
Biotin（生物素）
操作方法
⑴准备好脾细胞。
⑵在50ml沉淀管中混合108脾细胞和107小鼠骨髓瘤细胞，并加入50ml2.5%FCS－1640液。
⑶室温400g离心3min，使细胞沉淀。
⑷移去上清液。
⑸轻敲管底部，使沉淀流动，把沉淀管放于40℃水浴中，使其达融合温度。
⑹加预热至40℃的50%PEG0.8ml，用1ml吸管缓慢滴加，边加边摇沉淀管，肉眼观察可见有颗粒出现，滴加过程要求持续2min。
⑺加1ml1640液，边加边摇动，持续1min。
⑻重复⑺一次。
⑼加1ml1640液，边加边摇动，持续0.5min。
⑽重复⑼一次。
⑾加1640液15ml。
⑿室温，400g离心1min，使细胞沉淀。
⒀去上清，轻敲管底部，加25ml含有HAT的完全1640液。
⒁往已于前一日种有饲养细胞的40孔塑料培养盘中滴加融合的细胞液，每孔1滴（约0.05ml）。
⒂轻摇后，放入5%CO2饱和湿度的37℃温箱中培育。
⒃第3、6、9、10日换入含HAT的完全1640培养液。注意轻轻吸取上清液，勿将固定于孔底的细胞吸出，根据需要加入适量的饲养细胞。
⒄于第12、15日加入含有HAT的完全1640培养液。在每次换液前用倒置显微镜观察，大约在10天左右就可观察到杂交瘤细胞生长出来。大多数杂交瘤细胞在10~20天内出现，但也有在1个月左右才能出现的。杂交瘤细胞出现后，吸取上清液，检查抗体。
⒅对继续生长的杂交瘤细胞进行增殖传代。在传代过程中，依情况取消HAT液和完全1640液而代之以10%FCS－1640液。同时保存于液氮和进行克隆化，在这期间每代都要检查抗体，以防止产生抗体细胞的变异和丢失。