生化检测(Biochemical detection)顾名思义是指用生物或化学的方法来对样本进行检测。测定指标通常为酶类、糖类、脂类、蛋白和非蛋白氮类、无机元素类等生物化学指标或者机体功能指标。在临床上,我们的医学检验就经常要用到生化检测,而在科研方面,生化检测更是为物质含量测定、酶活力快速检测、药物研发等方面提供各种便捷。
常见的生化检测可简单分为两类:酶活检测,底物或产物检测。如按照指标的具体作用又可分为:氧化与抗氧系列、谷胱甘肽系列、氨基酸代谢系列、脂质代谢系列、氮代谢系列、辅酶I系列、辅酶II系列、神经递质系列、维生素系列、糖代谢系列、离子系列、酯酶系列等。
生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应,其反应过程可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图,如下所示:
延迟区
无规律可寻。
等速区
对应的是速率法,一般应用于酶类项目,可以使用因数法来计算待测浓度。
过渡区
对应的是固定时间法,目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。
平衡区
对应的是终点法,主要是测定某物质在样本中的含量。利用某物质与显色剂反应后,生成的物质与原来的颜色有区别,在某一波长下,吸光度的强弱与物质的含量呈正比关系,进而计算出该物质含量水平。
生化试剂盒样本检测的一般要求
1.样本处理完之后尽快进行检测,且实验过程中,样本尽量保存放置在冰上。2.样本值应在试剂盒的线性范围内,如果超过试剂盒的检测范围上限,样本需要稀释处理;如果低于试剂盒检测的下限值,样本需要进一步浓度以提高浓度。3.取完样短时间内不能立即检测,需要将样本保存在-80度。
生化试剂盒如何保存
生化试剂盒的保存需要参考说明书中各试剂组分的具体要求,按照说明书中对应组分的保存条件进行保存。有些试剂需要保存在-20°C条件下,这些试剂使用的饿时候应尽量避免反复冻融的问题;有些试剂需要避光保存,也需要严格按照要求来保存,避免应保存不当,造成试剂的失效。
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