上等现货 ATCC 迪庆绵羊皮肤成纤维样细胞株[产品打印页面]

拿到迪庆绵羊皮肤成纤维样细胞株细胞后，应该注意什么？
    收到迪庆绵羊皮肤成纤维样细胞株细胞后先不要开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察迪庆绵羊皮肤成纤维样细胞株细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议对收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况。
    收到迪庆绵羊皮肤成纤维样细胞株细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度：如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养，剩余培养液可与新配制的培养液按一定的比例混合使用，待细胞生长稳定后可替换成新配制的培养液；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

在进行细胞培养操作之前呢，我们先来了解一些细胞的基本知识吧！

细胞培养过程*重要的有两点：一是无菌无污染；二是稳态环境。
    无菌操作：无菌操作很重要，这对细胞培养影响很大。不要以为加入双抗或三抗就可以了。双抗或三抗的添加不仅对细菌或真菌的耐受性增加了，更容易染菌。其次抗生素添加的含量对细胞生命代谢是有一定的毒性作用的，尤其是在做转染的时候。
那么无菌操作该怎么做才能尽可能的防止被污染？
    首先是超净工作台的摆放已以及及时灭菌。里面应尽可能少摆放一些没用的东西，比如枪头、离心管等。工作台内右边摆放一瓶75%的酒精，左边摆放一包无菌擦拭纸，15ml和50ml两个管架，正前方摆放各量程的移液枪，以及一盏酒精灯。每次使用前后均用75%酒精喷洒，擦手纸擦拭，紫外含臭氧灭菌30min。
    其次是操作过程的细节注意。将培养基经过75%酒精擦拭后放入工作台的左边，垃圾桶喷洒75%酒精后放在*右边，枪头喷洒75%酒精放于右中间，含有细胞的培养瓶75%酒精擦拭后放置于左中间，将酒精灯放于正中间并点燃，培养瓶打开过火放于酒精灯旁开始传代或换液等操作。整个过程尽可能靠近火源，以*快的速度操作完。
    *后培养箱每隔一段时间进行清洗消毒灭菌操作，保证培养环境无菌。

稳态环境的培养：培养基和血清的的选择很重要，一般能用进口尽量选择进口的。国内很多产品处理的效果不如国外的，对于原代细胞培养尤为重要。买来的培养基和血清应及时分装以保证无菌。切勿使用37℃水浴加热，应在4℃冰箱慢慢融化，避免影响血清的质量。血清*好使用胎牛血清，添加含量为10%，不宜过高，短时间可以，长时间容易毒害细胞造成细胞分化和衰老。
    细胞培养过程不能过于频繁换液，应隔3天左右更换或者培养基颜色变黄，所以应每天都去观察细胞生长的状态，及时处理。

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