前列腺素F2α操作步骤 : 1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照(标准品)50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀 3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。 4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。 7. 温育:重复操作同 3。 8. 洗涤:重复操作同 5。 9. 显色:每孔先加入显色剂 A 50μl,再加入显色剂 B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟 10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色) 。 11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值) 。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
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试剂盒的应用种属、检测样本的种类:除试剂盒特别说明外,一般不同种属不能通用。常见待测样本种类有:血清和血浆(不同抗凝剂),细胞上清,和细胞裂解液,试剂盒中不同样本的稀释液不混用;
关键字:前列腺素F2α,试剂盒的检测范围:也就是标曲范围,特别要注意待测样本浓度是否落在标曲范围内,对于浓度很高的样本,可以先进行预实验摸索到比较好的稀释倍数后再大量测定样本。
关键字:前列腺素F2α,试剂盒中的稀释线性及回收率: a.稀释线性一般指样本稀释线性,是将样本梯度稀释下来,看各稀释梯度浓度是否成线性;参考样本稀释线性可以选择样本的佳稀释倍数; b.稀释线性也有做加标稀释线性的情况,加标稀释线性是将标准品加入样本中测定加入的标准品浓度测定是否准确;同样也是确定待测样本稀释倍数的参考指标。一般线性和回收率的范围在80%-120%比较合适;
关键字:前列腺素F2α,试剂盒的其它指标: a.灵敏度:试剂盒能够检测到的样本低浓度的能力,如果待检指标含量很低,需要选择高灵敏度的ELISA试剂盒; b.板间和板内的变异系数(CV%):反映板内和不同板之间是否均匀,CV%一般小于10% 比较好。 试剂盒的有效期:试剂盒的有效期一般是半年至一年,样本准备时间需要考虑到试剂盒的有效期。
关键字:前列腺素F2α 用于体外诊断。试剂盒用于检测与人体组织或细胞标本。前列腺素F2α 适用范围为冰冻切片和石蜡包埋组织切片,新准备好的细胞,和固定的培养细胞。欢迎咨询我司自产前列腺素F2α 。
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