ECV-304人脐静脉内皮细胞
规格:70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
特点:细胞代数为2-3代
包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell、DSMZ、ECACC、国内
货期:1-2周
运输方式:快递运输
ECV-304人脐静脉内皮细胞
售后服务:
复旦大学提供原代/传代细胞,质量保证,生长状态良好,没有细菌 真菌 支原体等微生物污染。细胞一般以T25培养瓶包装,容积75ml细胞数量可达10的6次方左右。购买方收到细胞应当马上检查,如发现细胞状态不佳或者大部分死亡情况下,须当天联系我司。得到我技术确认后免费补发一株。一周内发现细胞有污染情况,请拍照记录并与销售部联系。
售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真或E-mail致销售人员,我们将尽快为您解决。
备注:刚收到细胞时,胎牛血清可以用15%培养两三天,利于细胞尽快恢复状态,细胞状态稳定后,再调回10%即可。
细胞污染和补救方法:
一、菌污染
状态:若细胞出现细菌污染,肉眼观察培养基会发现培养基颜色变黄,浑浊,显微镜下观察培养基,发现培养基中有黑色细沙状的物体,有规律的移动,对细胞的生长影响明显,严重时会导致细胞裂解死亡。
<菌污染>
预防和补救:
1.保证细胞操作是处于完全无菌的状态;
2.将培养箱彻底消毒灭菌,如使用84消毒液及75%酒精擦拭培养箱,另外需定期对培养箱进行消毒处理;
3.将感染细菌的细胞及时丢弃,防止污染其他细胞。
二、霉菌及真菌污染
状态:肉眼观察培养基发现培养基颜色基本无变化,不浑浊,但是培养基中由絮状漂浮物,显微镜下观察,若感染真菌可看到分叉细丝状的结构(不同种类结构不同),若感染霉菌显微镜下可看到片状的结构,不透明,真菌及霉菌对影响细胞的生长影响不大。
<真菌污染>
预防和补救:
1.保证细胞房的干净整洁,干燥的环境(潮湿的环境利于霉菌及真菌的生长)。
2.控制外来人员进出实验室。
3.对实验室及培养箱进行彻底消毒。
4.若细胞非常珍贵,且不易获得,可以对污染的细胞采取如下操作。
悬浮细胞:收集SCL-1 Cell并离心,用PBS漂洗,重复此操作数次。
贴壁细胞:用PBS轻轻冲洗细胞,丢弃,重复此操作数次。
三、支原体感染
状态:在普通光学显微镜下无法观察到支原体,需使用光学显微镜或者电镜进行观察,细胞感染支原体后,生长极其缓慢,形态不佳,培养基无明显变化。
预防和补救:
预防:实验室新购买的血清及培养基需检测是否含有支原体,引进的新品种细胞需做支原体检测,向培养基中添加预防支原体的抗生素。
补救:向培养基中添加抗生素,(如氧氟沙星10 μg/ml、环丙沙星10 μg/ml、卡那霉素20~50 μg/ml、四环素10~50 μg/ml、庆大霉素200μg/ml等抗生素),或者向培养基中添加支原体清除剂清除支原体数天。
四、黑蛟虫
状态:在普通光学显微镜下可观察到培养基中有许多黑点,但当细胞密度大时,黑点会减少,培养基无明显变化,一般不会影响细胞的生长。黑胶虫来源于血清中。
<黑蛟虫污染>
预防和补救:一般黑胶虫不会影响细胞的生长状态,可以尝试改变培养基的品牌。血清冻融采取逐级冻融的方法。
五、原虫感染
状态:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可用生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生,但会与SCL-1 Cell争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞占优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,zui终形成恶性循环。
<原虫污染>
影响细胞污染的因素很多,在我看来污染源主要是是细胞操作及细胞培养箱环境。这需要我们:
1、提高细胞操作技巧,禁止交叉使用枪头,在酒精灯火焰5公分距离内操作。
2、定期对细胞培养箱消毒,培养箱水盘中的水也要定期更换,并使用无菌水。
3、进入细胞房之前及在无菌操作台操作SCL-1 Cell实验之前需使用紫外灯照射30分钟。
4、每次开培养箱之前需用酒精消毒双手。
5、定期对培养箱进行消毒。
6、配制的培养基需验证无菌后方可进行细胞培养。
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