描述
HaemoScan 高强度 HRP-化学发光 ELISA 底物使用增强的化学发光配方,产生的发光信号强度是**竞争对手的 4 倍,强度是标准 Luminol + Phenol 基底物的 13 倍 [1](图 1),在 ELISA 过程中提供高灵敏度。该底物的发光信号在几分钟内达到*大值(图 2)。基于化学发光的 ELISA 通常在黑色或白色不透明微孔板中进行,但也可以在试管中进行。
图 1.使用基于鲁米诺的 HaemoScan 高强度 HRP-化学发光 ELISA 底物发出高强度光信号。在室温下,使用白色不透明 Nunc Maxisorp 微孔板,通过酶联免疫吸附测定 (ELISA) 分析肠道脂肪酸结合蛋白 (IFABP)(又名:脂肪酸结合蛋白 2 [FABP2])校准品。在*后的孵育步骤 (链霉亲和素-HRP) 之后,用磷酸盐缓冲盐水 + 0.10% 吐温 20 洗涤微孔板,pH 值为 7.4,每孔加入 100 μL 底物。在平板摇床上孵育 10 秒后,1 分钟后以增益 110 测量发光(GENios,Tecan Trading AG,瑞士)。
图 2.使用基于鲁米诺的 HaemoScan 高强度 HRP-化学发光 ELISA 底物快速生成光。将链霉亲和素-HRP 在 0.1M Tris、pH 8.5 中稀释至 800 pg/mL,并将 50 μL 转移至白色不透明 Nunc Maxisorp 微孔板中。加入 50 μL HaemoScan 高强度 HRP 化学发光 ELISA 底物后,将微孔板在室温下在摇床上孵育 10 秒,并以 120 的增益每隔一分钟测量发光(GENios,Tecan Trading AG,瑞士)。
特征
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高信号强度(信号强度是标准 Luminol + Phenol 基底物的 13 倍 [1])
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快速产生光(在几分钟内产生*大信号)
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动态范围大(检测低至 pg 级)
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高信噪比(低背景)
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操作方便(易于使用的两种组分 1:1 混合物)
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方便的储存(环境运输和储存条件)
应用
HaemoScan High Intensity HRP-Chemiluminescence ELISA 底物是一种用于检测辣根过氧化物酶 (HRP) 活性的增强型化学发光底物,经过优化可在 ELISA 中检测皮克级蛋白。
原则
过氧化物酶(如辣根过氧化物酶)在过硼酸盐等催化剂存在下催化鲁米诺氧化成 3-氨基邻苯二甲酸酯。该反应伴随着 425 nm 的光发射。通过使用化学发光仪测量相对光单位 (RLU) 来定量基于化学发光的 ELISA。与比色(显色)底物相比,化学发光底物仅在酶-底物反应发生后产生持续存在的有色产物,而化学发光底物仅在酶-底物反应过程中产生光,并且可以立即测量。
储存及稳定性
产品在室温下可稳定保存至少一年。
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