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RNA纯化试剂盒纯化技术的分析
RNA纯化试剂盒提供了一种从培养的动物细胞、组织样品、血液、**、酵母、**、植物和病毒中快速提取和纯化总RNA的方法,。该试剂盒可以纯化所有大小的RNA,从大的mRNA和核糖体RNA到小RNA(microRNA或miRNA)和小干涉RNA(siRNA)。RNA优先从蛋白等的细胞组分中纯化出来,而不使用抑制的苯酚或者氯仿。纯化的RNA是高度完整的,可以应用到一系列的下游应用试验中,包括实时PCR,Northern**印迹分析,RNase保护实验和引物延伸,以及表达芯片分析。
纯化技术
纯化的基础是旋转柱色谱法,用特有的树脂作为分离介质。RNA优先从其他细胞组分(如蛋白质)中分离出来,而不使用苯酚或者氯仿。纯化步骤包括首先用合适的裂解液融解细胞或组织,然后裂解液中加入乙醇后上样到旋转柱中。树脂结合RNA是基于离子的浓度,所以只有RNA结合到柱子上而所有剩余的蛋白和其他的污染物会在流动液中而被除去或者仍在树脂的顶部。然后结合的RNA用试剂盒提供的洗涤液洗涤以除去所有残余的杂质,然后纯化的总RNA用抽提缓冲液洗涤。纯化的RNA是高度完整的,可以用于一系列的下游实验分析。
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