Tca-8113;人舌鳞癌细胞背景资料:
Tca-8113源于原位舌鳞癌的活检组织;组织块培养法培养7天开始生长,**传代71天,已传160代;传代时间为38小时;传代第3天有丝分裂指数为61%,移植效率为86%,软琼脂克隆生成率为53%~57.7%。**抑制的C57BL/6和ICR幼小鼠皮下移植成功;电镜和组化特征与鳞癌相符。STR检测发现该细胞被HeLa细胞污染。
细胞培养的基本原理与技术:
Tca-8113;人舌鳞癌细胞培养技术广泛用于科研、教学及临床研究实验,这项技术看似简单又不太容易操作。首先从概念上说,细胞是生命的*小单位,离体以后失去了生命体给予的一切复杂的机体内环境,在实验室内能够生长并形成一定生长规律,是研究者们经过长期研究摸索总结得到的科研成果。其次,细胞培养的成功与否要受各种因素的影响,从操作环境、使用器械、个人操作手法到细胞培养需要的营养需求及支撑条件,每一个环节相互影响,哪一个环节出现问题都会对培养的细胞带来影响。
一. 传代前准备: 1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。 2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。 3.正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且可减少污染。 4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。 5.准备好将要使用的**后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次**。 6.取出预热好的培养用液:取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。 7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。 8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口**。 二.胰蛋白酶消化; 1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞*好,*佳消化温度是37℃。 2. 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。 3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。
Tca-8113;人舌鳞癌细胞细胞培养问题: 问:我养的Tca-8113;人舌鳞癌细胞细胞,传多少代以后不能用、需要重新复苏新的呢?我总觉得细胞形态不好,但长的还挺快! 答:初代培养的细胞在培养条件较好情况下,细胞增殖旺盛,并能维持二倍体核型,为保持二倍体细胞性质,细胞应在初代培养期或传代后早期冻存。如不冻存,则需反复传代以维持细胞的适宜密度,以利于生存。但这样就有可能导致细胞失掉二倍体性质或发生转化。一般情况下当传代10-50次左右,细胞增殖逐渐缓慢,以至完全停止。组织和细胞在培养中生命期如何,这要看细胞的种类、性状和原供体的年龄等情况。如人胚二倍体成纤维细胞培养,在不冻存和反复传代条件下,可传30-50代,人胚肺成纤维细胞可传50代±10代,人胚肾只有8-10代,人胚神经胶质细胞15-30代等。而肿瘤细胞系多由癌瘤建成,多呈类上皮型细胞,常能传几十代或百代以上,具有永生性及异体接种致瘤性等特点,但随着传代次数的增多,细胞增殖也会逐渐缓慢,形态亦会变化。另外,看看你的培养条件是否严格按照该肿瘤细胞的要求进行,条件变了细胞亦会适应新的环境而发生改变。可试试用质量好的进口血清培养,看细胞长的如何。
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