A549(人肺腺癌细胞)
【细胞货号】 C4215
【细胞缩写】 A549细胞
【细胞名称】 A549(人非小细胞肺癌细胞)
【背景资料】 该细胞系是1972年由Giard DJ通过肺癌组织移植培养建系的，源自一位58岁的白人男性。A549能通过胞苷二磷脂酰胆碱途径合成富含不饱和脂肪酸的卵磷脂；角蛋白阳性。
【细胞来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN以及少数国内外大学建系
【代次】 P4
【规格】 复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管（两支）
【细胞数】 1*10（6）
【生物**级别】 1
【生物体】 人
【组织来源】 肺癌
【细胞形态】 上皮细胞样
【细胞特性】 贴壁
【细胞活力】 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
【细胞检测】 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**
【培养条件】 详见细胞说明书
【传代方法】 建议1:2-1:3 两天换液一次
【冻存条件】 详见细胞说明书
【主要文献】 请具体查阅相关发表文章
2）边观察边消化，根据细胞的形态，终止消化时间，采取以半分钟间隔吹打细胞边缘，如可吹打下来，即终止消化。客户摸索比较好的消化时间。
3）随细胞有一份细胞操作说明书，请客户仔细查看。 4）记得加1%双抗，降低被污染的概率。另外尽早冻存留种，以备后用。
5）售后时间为一周，**于细胞本身的质量问题，而因乙方自己不当操作（不规范操作，消化过度，不加双抗导致的污染等）导致的细胞问题不在售后范畴。 6）收到细胞后，如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，烦请当天尽快联系，以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据，请您务必重视。 7）刚收到细胞时，胎牛血清可以用15%培养两三天，利于细胞尽快恢复状态，细胞状态稳定后，再调回10%即可。 （其中1,2条针对于贴壁细胞，悬浮细胞详情请见细胞操作说明书） A549(人肺腺癌细胞)传代操作步骤： （一）贴壁细胞传代 1）提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。 2）吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞。 3）加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用。 4）用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡。 5）将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。 （二）悬浮细胞传代 1）将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min。 2）弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液。 3）将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。