反射或落射(EPI)照明普遍用于生物显微镜的萤光激发应用。然而大多数应用于教育和医疗领域的生物显微镜都不配备有落射萤光照明。即使在很多的**的生物显微镜中,落射照明仍属于昂贵的选项。为了使落射萤光照明在大多数显微镜上成为可能,可以在几乎所有 显微镜上使用一种廉价的照明而无须对显微镜作任何改变。
贯穿镜筒式(TET)落射(EPI)照明是由Might ex Systems开发并申请**的显微镜照明方案。TET-EPI 照明把光从典型双筒显微镜的一个镜筒射出。光穿过显 微镜物镜照射到样品上,与传统的落射照明设置一样。 TET-EPI照明能像适应于普通物镜一样适应于眼球。 图像可以通过另一个镜筒或者照相镜筒来观察。同样的, TE-EPI照明光源也可以插入到照相镜筒中。在本例中,如果显微镜在照相镜筒和目镜筒之间配备有光束分离器的话,那么图像从两个镜筒中都可以看到。
特点
•低成本萤光配件
•几乎使用于所有双筒显微镜
•无须改变显微镜
•无须校正
•长寿命的LED照明
•图像亮度随着目标放大而增 加
•还可以通过光纤电缆使用弧 光及激光
应用
•萤光显微镜
该系统图(图1)说明了一个典型的配备有TET落射照明显微镜。光源是一个高功率的单色LED光源。在 LED后面配置了聚光系统后就可以使得LED发射区域被成像在显微镜目镜的出射口,在整个视场区域形成 均匀的柯勒照明系统。 来自LED光源的光再经由刺激滤光片过滤,该滤光片的带宽从几个nm到几十个 nm。可以有各种不同的可见光波长和滤光片供选择。由于和传统的刺激光源比如弧光和激光相比,LED的 亮度还很低,所以需要选用更大通过带宽的刺激滤光片。
来自样品的萤光穿过物镜再经由双筒镜头内的分束器到达另一目镜管。位于成像通道上的滤光片拦截 下所有被样品或者其它显微镜内表面反射出来的刺激光。有一点很重要,那就是在刺激波长范围内的滤光 片的光密度要大于6。有一个很方便的安装滤光片的位置是在目镜里面设计放十字架的位置。如果要使用 相机的话,那么还需要在相机或者其它成像通道上安放滤光片。
LED的一个独特的地方是它们可以在每隔10nm的响应时间内随时打开或关闭。快速的响应时间使得LED在对萤光的时间分辨率研究中非常有用。LED光源也可以用脉冲模式在和相机连接后来记录萤光图 像。在脉冲模式下的LED峰值电流可以高于CW模式的数倍,产生更高的光功率以及更明亮的图像。另 外,LED可以完全调光而很少改变波长。
其它的一些光源如弧光灯、激光及白炽灯也可以通过光纤光缆连接到TET照明器上。