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用偏光显微镜如何用割断法进行观察

发布时间:2015-02-12
    如果偏光显微镜样本以苯乙烯树脂做为包埋剂,再行割断法做扫描电镜观察是十分方便的。因为苯乙烯聚合后,氧化丙烯及醋酸异戊酸等很容易将其溶解,多次更换溶剂便可将苯乙烯**干净.因此,在制做透射电镜标本时,多做出几个包埋胶囊样本,待聚合后,偏光显微镜按上述方法割断,尼康偏光显微镜将割断好的样本放在氧化丙烯中,约2小时后便可经醋酸异戊醋置换、临界点干操.
    偏光显微镜价格除树脂割断法外,尚有有机溶剂(酒精、醋酸异戊醋等)割断法,偏光显微镜水溶性包埋剂(二甲基亚矾、甘油等)割断法及其它(冷冻、奴里昂等)割断法,操作都很容易。再以酒精割断法为例:样本固定后用酒精脱水。当脱水完成后,偏光显微镜将样本投入顶先装有无水乙醉的胶囊中(避免出现气泡)。偏光显微镜将胶囊放在低温装里内使乙醉固化.进行样本割断。割断的样本立即进入置于室温的无水乙醉中,待乙醉融化后移入醋酸异戊酷、进行临界点干操.
    需指出的是经割断法制备的标本需要用高分辨率的偏光显微镜(如场发射电子枪扫描电镜)进行观察.一般的扫描电镜分辨率低于透射电镜,若用偏光显微镜镜割断法观察组织、细胞的内部结构,以和透射电镜图相对比,必须用场发射电子枪扫描电镜.由于偏光显微镜立体感较强,割断样本在镜下显现出高尔基扁平囊与大泡、小泡的空间分布,线粒体蜡像隔板一样伸展;核搪体像小蘑菇一样附着在内质网“板”上。尽管如此,有些学者认为偏光偏光显微镜割断法并未提供细胞结构的新信息。因此该方法应用不广泛。

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