9°N DNA 连接酶

9°N DNA 连接酶

产品及特点
9o N DNA连接酶能够催化磷酸二酯键的形成，使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的 5' -磷酸末端和 3' -羟基末端通过磷酸二酯键相连。该酶在 45℃-90 ℃ 范围内均有活性。具体有下列特点：
9°N DNA 连接酶1. 可在高温条件下，连接 DNA 链上的切刻位点
2. 具有极高的耐热性，与 PCR 反应条件兼容
3. 可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测
4. 通过 PCR 扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变
9°N DNA 连接酶反应条件
1 X 9 oN DNA 连接酶反应缓冲液 [10 mM Tris-HCl，600 μM ATP，2.5 mMMgCl2，2.5 mM DTT， 0.1% Triton X -100 (pH 7.5 @ 25℃) ]。1X 9oN DNA连接酶反应缓冲液中，底物 DNA 和酶于 45℃ 温育 15 分钟，或者设定合适的反应条件使用热循环仪进行反应。连接反应通过加入含 50%甘油，50 mM EDTA 和溴酚蓝的混合物来终止。
单位定义(粘性末端活性单位)
1 单位指 50 ul 反应体系中，45℃ 条件下，15 分钟能使 50% 的 1 ug BstEII
消化的 λ DN***段（12 bp 粘性末端）发生连接所需要的酶量。粘性末端活性单位相当于切口封闭单位。
Buffer 成分
10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，200 μg/mlBSA，50% Glycerol，10 mM ammonium sulfate
9°N DNA 连接酶注意事项
9oN DNA 连接酶不能代替 T4 DNA 连接酶使用。该酶可以有效连接 12 bp 的互补片段，但却无法连接 4 bp 的互补片段（典型限制酶消化产物）。
参考文献
(1) Thermococcus sp. （strain 9°N-7）isolated by Dr. Holger Jannasch,
Woods Hole Oceanographic Institute, 1991.
(2) Barany, F. （1991） Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, 189–193.
(3) Takahashi, M. et al.（1984） J. Biol. Chem., 259, 10041–10047.
(4) Barany, F. （1991） The Ligase Chain Reaction in a PCR World （pp.
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(5) Michael, S.F. （1994） Biotechniques, 16, 411–412.
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60906-50（限7折） cDNA**链合成试剂盒（限7折） 50次
70701-50P 柱式病毒DNAout 50次
18-0790-100 多聚半乳糖醛酸酶(PG)测试盒 100管/48样
3090-250p 天净沙RNase**剂A型(固相RNase**剂) 250mL
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3090-250P 固相RNase**剂 250mL
71206-50P 柱式动物DNAout 50次
3060-250 非冻型组织RNA保存液 250mL
3092-100P 溴化乙锭**剂 100次
RNA系列
3060-100/250 非冻型组织RNA保存液 100 mL/250ml 390/790
111202-10/100 非冻型血液RNA保存液 10 mL/10ml 150/690
80601-100/250 非冻型**RNA保存液 100 mL/250ml 490/990
3070-100/250 动物RNAout（TRIzol） 100 mL/250ml 390/790
71201-250 柱式动物RNAout 250次 1990
71202-50 柱式血液RNAout 50次 890
101121-50 柱式软骨RNAout 50次 990
81102-30 石蜡包埋组织RNAout 30次 890
81220-50 柱式昆虫RNAout 50次 990
101113-50 柱式软体动物RNAout 50次 1290