稳定细胞株筛选技术服务

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品牌：伟通生物

公司名称：深圳市伟通生物科技有限公司

所在地：广东深圳

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产品简介

稳定细胞株筛选

稳定表达细胞株（稳转细胞株）指在细胞中持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。稳转细胞株的目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上，使细胞长期稳定表达该基因。
在基因功能的研究中，基因是否有效转染靶细胞，是功能研究的前提条件之一。

产品详细信息

稳定细胞株筛选

稳定表达细胞株（稳转细胞株）指在细胞中持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。稳转细胞株的目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上，使细胞长期稳定表达该基因。

在基因功能的研究中，基因是否有效转染靶细胞，是功能研究的前提条件之一。而稳定表达细胞株则弥补了瞬时感染（或转染）一些功能实验中由于外源基因表达时间短的缺陷，便于长期观察基因对于细胞功能的影响以及蛋白间相互作用。

用转染质粒或病毒侵染的方法将构建好的含靶基因的载体导入细胞，根据不同的基因载体中所含的抗性标志选用相应的**进行筛选混合阳性克隆。在阳性混合克隆的基础上，得到单细胞长出的阳性单克隆，继而得到稳定转染细胞株。常用的真核表达载体的抗性标志物有嘌呤霉素（puromycin）、潮霉素（hygromycin）和新霉素（neomycin）。

伟通生物有着多年构建稳转细胞株的经验，已在HEK293、293T、MCF7/ADR、A549、V79、MC3T3-E1、CHO、SiHa、3D4/2、HL7702、SW480、HepG2、SGC-7901、MGC-803、HT-29、Saos-2、U-2os、PC12、SK-BR-3、MCF-7、HMSC-ad 、GIST-T1、等多个种属细胞中成功构建过表达和RNAi稳转细胞株。

服务特点：

稳定：保证10代以内稳定转染细胞稳定表达。

迅速：一般控制在1个月以内完成构建。

经济：价格实惠，性价比高。

质量保证：对外源基因进行严格鉴定。

筛选稳定细胞株的两种方法

1、转染质粒后，单克隆方法筛选稳定细胞系

对大多数细胞转染效率较低。对于基因过表达，如果转染效率达到40%，基因过表达尚可。但是对于基因干扰实验，对转染效率要求远远高于基因过表达，通常质粒转染无法满足。

另外，质粒游离于细胞质中，很快降解，无法满足较长时间的检测项目；质粒转染整合几率极低，稳定细胞株构建耗时耗力，且得率很低，往往需要挑取单克隆株。

2、病毒感染筛选稳定细胞株

病毒感染方法较质粒转染筛选单克隆方法更方便和高效，是目前主流的稳定细胞系筛选方法。用慢病毒制备稳转细胞株，由于其高效整合、高效转录、高效表达、宿主范围广，感染效率高，且与细胞染色体整合而不发生基因重排，是制备稳定细胞株的理想载体。

稳定转染细胞株服务流程