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收到大鼠脑微血管内皮细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
大鼠脑微血管内皮细胞脑微血管内皮细胞是血脑屏障的主要组成成分,能够限制可溶性物质和细胞等从血液进入大脑。大脑微血管内皮细胞与外周内皮细胞相比具有一些相同特性。如:1)脑微血管内皮细胞存在许多细胞间紧密连接,产生很高的跨内皮阻抗,延迟细胞旁的通量;2)脑微血管内皮细胞缺乏内皮细胞的窗孔结构,其液相物质胞饮水平较低;3)脑微血管内皮细胞具有不对称定位酶和载体介导转运系统,从而产生 “两极分化”的表现型。 与外周内皮细胞相同,大脑微血管内皮细胞表面表达细胞粘附分子,调控白细胞进入大脑。由于微血管内皮细胞的器官特异性,内皮细胞通常取源于**研究的相关组织。
推荐培养基: (ECM, Cat. #1001)
参考文献:
[1] Crone C, Oleson SP. (1992) “Electrical resistance of brain microvessel endothelium.” Brain Res. 241: 49-55.
[2] Reese TS, Karnovsky MJ. (1967) “Fine structural localization of blood-brain barrier to exogenous peroxidase.” J Cell Biol. 34: 9-14.
[3] Wolburg H, Neuhaus J, Kniesel U, Kraub B, Schmid EM, Ocalan M, Farrell C, Risau W. (1994) “Modulation of tight junction structure in blood-brain barrier endothelial cells.” J Cell Sci. 107: 1347-1357.
大鼠脑微血管内皮细胞传代方法:
收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶**后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,大鼠脑微血管内皮细胞倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代;2~3天1次。
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注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造
成生长不好。
冻存方法: 冻存液:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
储存:液氮储存
大鼠脑微血管内皮细胞其它细胞系展示表:yb-hxbz-195 人肺鳞癌细胞 LTEP-s 规格25毫升/株.
yb-hxbz-196 人小细胞肺癌细胞 LTEP-sm 规格25毫升/株.
yb-hxbz-197 人小细胞肺癌细胞 LTEP-P 规格25毫升/株.
yb-hxbz-198 人肺癌细胞 973 规格25毫升/株.
yb-hxbz-199 人胚肺成纤维细胞 HELF 规格25毫升/株.
yb-hxbz-200 人低转移肺癌细胞 95-C 规格25毫升/株.
yb-hxbz-201 人高转移肺癌细胞 95-D 规格25毫升/株.
yb-hxbz-202 人肺腺癌细胞 A2 规格25毫升/株.
yb-hxbz-203 人支气管上皮细胞 HBE 规格25毫升/株.
yb-hxbz-204 人支气管上皮细胞 16HBE 规格25毫升/株.
人泌尿系统细胞株
yb-hxbz-205 人肾癌细胞 Ketr-3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-206 人肾癌细胞 OS-RC-2 规格25毫升/株.
yb-hxbz-207 人肾透明细胞腺癌细胞 786-O 规格25毫升/株.
yb-hxbz-208 人肾小球髓母细胞 HBZY-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-209 人肾小球系膜细胞 HMC 规格25毫升/株.
yb-hxbz-210 人肾上腺皮质腺癌细胞 NCI-295R 规格25毫升/株.
yb-hxbz-211 HEK293,人胚肾上皮细胞 293A 规格25毫升/株.
yb-hxbz-212 人胚肾细胞 293 规格25毫升/株.
yb-hxbz-213 SV40永生化的人胚肾上皮细胞 293T 规格25毫升/株.
yb-hxbz-214 SV40T转化的人胚肾细胞(亚系) 293T/17 规格25毫升/株.
yb-hxbz-215 人类胚胎肾脏表皮细胞 H293T 规格25毫升/株.
yb-hxbz-216 人胚肾细胞(亚系克隆) FIP293 规格25毫升/株.
yb-hxbz-217 稳定表达EBNA1的人胚肾细胞 293E 规格25毫升/株.
yb-hxbz-218 表达SV40T和EBNA1的人胚肾细胞 293ET 规格25毫升/株.