产品名称：人结肠粘膜上皮细胞

提供的人结肠粘膜上皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。研发的人结肠粘膜上皮细胞完全培养基(CM-H040)能提供细胞*佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。

   同时，还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、**及其他类型的**。

购买细胞注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。

4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的完全培养基。

5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和l技术部沟通交流。

6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。

人结肠粘膜上皮细胞

Cat NO.: CP- H040

一、产品简介

1、产品名称：人结肠粘膜上皮细胞

2、组织来源：人结肠组织

3、产品规格：5×105cells / 25cm2培养瓶

4、细胞简介：

 人结肠粘膜上皮细胞，分离自正常人结肠组织，探讨正常人肠粘膜上皮细胞的分离、体外培养方法，为研究人肠粘膜上皮细胞以及与肠粘膜相关**建立合适的细胞模型。

 本公司生产的人结肠粘膜上皮细胞采用混合酶解法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶，细胞纯度可达85%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**等。

5、培养基信息：

1）培养基类型：DMEM

2）添加因子：FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin 等

二、细胞培养状态

发货时发送电子版照片

三、使用方法

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

1. 取出25cm2 培养瓶，75%酒精**，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。

2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3. 细胞传代

1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；

3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；

4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

四、注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。

3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

5. 该细胞只可用于科研。

备注：由于实验所用试剂与操作环境的不同，以上方法供各实验室参考。

细胞基本技术

冻存细胞的复苏
人结肠粘膜上皮细胞应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37.5度，取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。
在无菌台内将完全培养基加入50ml的小培养瓶内，约5ml左右，然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞，置培养并内轻轻摇晃，使细胞均匀后置培养箱内培养。
传代:
贴壁细胞:
对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml完全培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入完全培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞:
一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入完全培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入完全培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。
冻存 
 将贴壁细胞消化后离心收集，悬浮细胞直接离心收集，以完全培养基或胎牛血清重悬细胞至终浓度约106/ml。加入10%的DMSO。以每管1～2ml分装至冻存管中。用绝热材料包裹置-70摄氏度冰箱冷冻过夜。次日保存到液氮中。 
人结肠粘膜上皮细胞
支原体污染及检测：
  （1）.支原体污染在细胞培养中*常见、不易被查觉，但支原体污染可显著影响细胞功能干扰实验结果。支原体是介于**和病毒之间的目前所知能独立生活的*小微生物，它无细胞壁，形态呈高度多形性，*小直径0.2um，可通过滤器。
 1膀胱癌细胞
 支原体在污染细胞后，它通过影响细胞的DNA、RNA 的合成及急速消耗培养基中的氨基酸来抑制细胞的生长，并能降低细胞的融合率。因此，在运用各种细胞系进行实验研究时，首先要证明所用细胞有无支原体的污染。
 经过严格质控，不含有**、**、病毒（HIV、HBV、HCV）、支原体。
 （2）.支原体污染后，培养基可不发生浑浊，细胞病变轻微或不明显，因此难以发现。目前，支原体检测的方法有以下几种。
（a）.相差显微镜观察；
（b）.低张处理地衣红染色法；
（c）.荧光染色法；
（d）.酶标法；
（e）.PCR法：基础医学细胞中心使用该方法进行检测。
               优点：灵敏度高，检测耗时短，样品量小
              （只需50ul细胞培养用液上清）。
            缺点：引物及制剂费用较高。
               
                ★★★★★希望这些基本技术及资料可以帮到您★★★★★
人结肠粘膜上皮细胞
特点：
1.传代情况：P2 
2.活性好、稳定性高、适应性强，易培养
3.传代快、多：2-3天传一代，普通可传10代以上 肿瘤细胞无限制
4.纯度高达95% 无污染和其他杂细胞
5.有技术疑问可以提供一对一的解答：专业，及时，耐心
6.货期短，一般冻存管5-7个工作日，复苏7-15个工作日。

 ★我库细胞近3000种，来源于美国ATCC.
      种属来源：小鼠、大鼠、人、猴、牛
      组织来源: 各组织癌细胞、表皮细胞、上皮细胞、等等....
      细胞都是经过严格质量控制。

Colo205 人结肠癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Colo320DM 人结肠癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
D341 Med 人髓母细胞瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Daudi 人B**细胞瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
DU145 人前列腺癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
G-401 人肾癌Wilms 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
GLC-82 人肺腺癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HCT116 人结直肠癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HCT-8 人结肠腺癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HEC-1B 人**内膜癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Hela 人宫颈癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Hep G2 人肝癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Hep-2 人喉癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HL-60 人白血病细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HOS 人骨肉瘤细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HT-1080 人纤维肉瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HT-29 人结肠腺癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HuTu-80 人十二脂肠腺癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
JEG-3 人绒癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
JEG-3/VP16 人绒癌细胞VP16耐药株 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
JEG-3/VP16-IL-2 人绒癌细胞VP16耐药株IL-2转染 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
JEG-3/VP16-TNFa 人绒癌细胞VP16耐药株TNFa转染 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Jurkat E6-1 人T细胞**瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Jurkat77 人T**瘤细胞亚系 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
K562 人红白血病细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
KB 人口腔上皮癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
LNCaP 人前列腺癌（B类） 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
LoVo 人结肠癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
M17 人神经母细胞瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
M2 待查 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
MCF7 人乳腺癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
MCF7B 人乳腺癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周